湖南省12个赤拟谷盗品系对磷化氢和敌敌畏抗性测定

湖南省12个赤拟谷盗品系对磷化氢和敌敌畏抗性测定

王亚洲1,刘蔓文1,唐培安1*,陆月明2,赵叶飞3,冯俊3

1.南京财经大学 食品科学与工程学院/江苏省现代粮食流通与安全协同创新中心,江苏 南京 2100232.江苏省太仓市粮食局,太仓 2154003.江苏省太仓市粮食购销有限公司,太仓 215400

摘要:本文针对储粮害虫磷化氢抗性严重,影响储粮安全的现实问题,测定了湖南省12个赤拟谷盗品系的磷化氢和敌敌畏抗性水平,并对抗性分布和发展趋势进行分析。结果表明:12个品系的磷化氢抗性系数范围在1.7-44.4之间,其中,8个是敏感品系,其余4个为抗性品系。对不同场所的抗性情况分析发现,酒厂、加工厂、饲料厂和农户均有抗性品系和敏感品系,而来自粮库的1个品系为敏感品系,表明赤拟谷盗对磷化氢的抗性水平与场所没有显著相关性。对赤拟谷盗敌敌畏抗性水平测定结果表明,12个品系的致死中浓度(LC50)值在0.051-0.108 g/L之间,相对敏感性水平在2.1倍以内,表明这些赤拟谷盗品系对于敌敌畏的敏感性差异不大,推测其对敌敌畏的抗性水平较低。

关键词:赤拟谷盗;磷化氢;敌敌畏;抗性测定

Determination of resistance of the 12 Tribolium castaneum strains in Hunan Province to phosphine and DDVP

Wang Yazhou1Liu Manwen1Tang Pei’an1*Lu Yueming2Zhao Yefei3Feng Jun3

(1.Nanjing University of Finance and Economics School of Food Science and Engineering/ Jiangsu Province Modern Grain Circulation and Safety Collaborative Innovation Center, Jiangsu Nanjing 210023; 2.Taicang City Grain Bureau, Jiangsu Province, Taicang 2215400; 3.Jiangsu Taicang Food Purchase and Sale Corporation, Taicang 215400)

Abstract: In view of the practical problems of severe phosphine resistance of stored grain pests affecting the safety of stored grain, the phosphine and DDVP resistance levels of 12 Tribolium castaneum strains in Hunan Province were determined, and the distribution and development trend of resistance were analyzed. The results showed that the phosphine resistance coefficient of 12 strains ranged from 1.7 to 44.4. 8 strains were sensitive and the other 4 strains were resistant. Analysis of resistance in different locations found the wineries, processing plants, feed mills and farmers have resistant and sensitive strains, while one strain from the grain storage is a sensitive strain. It is indicated that the level of resistance to phosphine in Tribolium castaneum is not significantly correlated with the location. The results of measuring the level of resistance to DDVP in Tribolium castaneum show that the lethal concentration (LC50) of the 12 strains ranged from 0.051 to 0.108 g/L, and the relative sensitivity level was within 2.1 times. It is indicated that the sensitivity of these strains to DDVP is not much different, and it is speculated that the resistance level to DDVP is low.

Key words: red snail; phosphine; dichlorvos; resistance determination

赤拟谷盗(Tribolium castaneum)属鞘翅目(Coleptera),拟步甲科(Tenebrionidae),拟谷盗属(Tribolium),是一种危害严重的储粮害虫,分布遍及世界各地[1],其食性杂,可危害谷物、油料、动物性产品及加工品、中药材等,其中以面粉被害最重。除取食外,成虫会分泌臭液,大量发生时会对被害产品产生污染,造成巨大的经济损失[2]。磷化氢(PH3)是一种广泛应用于储粮害虫防治的熏蒸药剂,具有穿透性强、扩散性好、杀虫效果显著、成本低等特点[3]。然而由于长期,单一使用磷化氢以及操作不规范等原因,导致储粮害虫对磷化氢产生了不同程度的抗性,致使磷化氢的杀虫效果大幅度的降低[4]。敌敌畏是一种有机磷杀虫剂,具有触杀,熏蒸等作用,常被用作防治储粮害虫的空仓杀虫剂。本文测定了采自湖南省的12个赤拟谷盗的品系对磷化氢和敌敌畏抗性水平,并分析了抗性水平与采集场所的关系,不仅为储粮害虫磷化氢抗性治理提供基础数据,也为科学合理的储粮害虫防治提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 供试昆虫

供试昆虫采自湖南省不同地区和场所,具体情况见表1

1 供试害虫情况

品系名称

来源

地区

ML

岳阳汨罗酒厂

湖南省岳阳市汨罗县

XW

汨罗希望饲料厂

湖南省岳阳市汨罗县

LBC

岳阳罗滨村农户

湖南省岳阳市汨罗县

CK

湘阴长康饲料厂

湖南省岳阳市湘阴县

STC

湘阴石塘村农户

湖南省岳阳市湘阴县

HH

怀化农户

湖南省怀化市中方县

ZSK

中储粮怀化直属库

湖南省怀化市

DCQ

常德鼎城区农户

湖南省常德市鼎城区

JJ

常德金健粮食有限公司

湖南省常德市德山开发区

WL

常德武陵酒业

湖南省常德市德山中路

HY

湖南衡阳环球科技农业有限公司

湖南省衡阳市朱辉区

JX

金霞九鼎饲料厂

湖南省长沙市芙蓉北路

1.1.2 仪器与试剂

恒温恒湿培养箱(BSC-250),上海博讯实业有限公司医疗设备厂;电热恒温鼓风干燥(DUG-9246A),上海精宏实验设备有限公司;气密性注射器,Hamilton Company;电子分析天平,赛多利斯科学仪器有限公司;PH3气体检测仪,北京佳粮科贸有限公司;粉碎机,天津市泰斯特仪器有限公司;PH3发生和收集装置,自制;浓硫酸,南京市若研实验器材有限公司;磷化锌粉末,南京市若研实验器材有限公司;敌敌畏,南京市若研实验器材有限公司。

1.2 方法

1.2.1 饲料准备

使用全麦粉作为饲料。将小麦洗净后置于80 ℃干燥箱中消毒、烘干,干燥过程中每隔半小时对小麦进行翻动以保证小麦水分均匀。烘干后参照《GB5497-1985 粮食、油料检验水分测定法》调节小麦的水分至15±1 %,用粉碎机粉碎小麦成全麦粉,密封后放入冰箱中冷藏保存。

1.2.2 试虫培养

对于每个选定的品系,分别挑选数百只赤拟谷盗成虫,将其置于装有200 g全麦粉的500 mL广口瓶中,将广口瓶置于南京财经大学储藏物昆虫研究室内饲养,设定培养条件为:温度30±1 ,相对湿度75 %,无光照。待成虫产卵3 d后,挑出全部成虫并转移至另一瓶饲料中继续产卵,经过一段时间的培养后,挑选1~3周龄的羽化成虫进行试验。

1.2.3 磷化氢气体发生与浓度测定

采用联合国粮农组织FAO1975[5]推荐的排水集气装置,磷化氢气体由磷化锌和10%的硫酸反应制备而得,发生装置见图1

 

1 磷化氢气体发生装置

1.2.4 磷化氢抗性测定

采用联合国粮食及农业组织FAO推荐的磷化氢抗性测定方法,并稍作改动。通过预实验,设定5-7个浓度梯度,使试虫死亡率在16 %-84 %的范围内,设1个空白对照,每个浓度设3次重复。把50只试虫放入熏蒸瓶,用高真空硅脂把熏蒸瓶与玻璃旋塞密封。使用相应量程的气密性注射器抽取PH3气体,从熏蒸瓶上的橡胶塞注入熏蒸瓶内,轻轻摇匀,置于30 ℃、相对湿度75 %、无光照的培养箱中密闭熏蒸20 h。熏蒸结束后在通风橱中打开熏蒸瓶的玻璃旋塞,散气1 h后取出试虫,给饲料饲养至少3 d后,统计死亡数量,用毛笔触碰虫体,如果试虫的附肢都不动即视作死亡,记录每个浓度下试虫的死亡数与总数。

1.2.5 敌敌畏抗性测定

参考侯毅[6]等人的方法,并稍作改动。用丙酮将敌敌畏原油稀释成不同的浓度,通过预实验,设定5-7个浓度梯度,使试虫的死亡率在16 %-84 %,用丙酮做对照实验,每个浓度设3次重复。吸取1 mL丙酮稀释过的敌敌畏试剂,将试剂均匀的涂在9 cm直径的培养皿中,将培养皿放置在通风处1 h,待丙酮挥发之后,将30只试虫放于培养皿中,让其在培养皿中运动2 h。将处理过的试虫移到新的培养皿中,加入饲料,过24 h,统计死亡数量,用毛笔触碰虫体,如果试虫的附肢都不动即视作死亡,记录每个浓度下试虫的死亡数与总数。

1.3 数据处理

SPSS 17.0软件分析测定结果,分析得出12个品系的LC50值、LC99值和相应的毒力回归方程并计算抗性系数(Rf)以及相对抗性系数。

其中,抗性系数(Rf)=试虫实际LC50/敏感品系LC50。相对系数=试虫实际LC50/最小 LC50

2 结果与分析

2.1 赤拟谷盗磷化氢抗性测定

赤拟谷盗各品系的磷化氢抗性数据见表2。结果表明,12个赤拟谷盗品系的磷化氢抗性系数范围在1.7-44.4,其中,有8个品系是敏感品系,占调查总数的66.7 %;其余4个品系为抗性品系,其中,1个低抗品系,2个中抗品系,1个高抗品系,抗性品系占调查总数的33.3%。对不同场所的抗性情况分析发现,酒厂、加工厂、饲料厂和农户均有抗性品系和敏感品系,而来自粮库的1个品系为敏感品系,表明赤拟谷盗对磷化氢的抗性水平与场所没有显著相关性。与已有报道相比,本文所测定的赤拟谷盗磷化氢抗性水平不高。

2赤拟谷盗磷化氢抗性测定结果

品系

LC50(95%置信限) μg/L

回归方程

场所

Rf

XW

15.414.6-16.2

Y=-8.455+7.117X

饲料厂

1.7

DCQ

15.614.8-16.4

Y=-9.527+7.980X

农户

1.7

JX

16.315.4-17.3

Y=-8.499+7.009X

饲料厂

1.8

HH

21.118.8-23.5

Y=-8.637+6.522X

农户

2.3

LBC

26.725.7-27.7

Y=-15.083+10.569X

农户

3.0

ML

27.025.6-28.5

Y=-11.071+7.735X

酒厂

3.0

ZSK

27.325.0-29.6

Y=-6.337+4.414X

粮库

3.0

HY

32.129.8-34.6

Y=-6.520+4.327X

加工厂

3.6

CK

49.1 (44.0~54.3)

Y=-3.484+2.060X

饲料厂

5.5

STC

178.4148.7-227.5

Y=-4.848+2.153X

农户

19.8

JJ

182.1151.6-240.7

Y=-6.378+2.822X

加工厂

20.2

WL

399.3362.0-44.05

Y=-7.201+2.768X

酒厂

44.4

2.2 赤拟谷盗敌敌畏抗性测定

12个赤拟谷盗品系的敌敌畏抗性数据见表3。结果表明,12个品系的致死中浓度(LC50)值在0.051-0.108 g/L之间,相对敏感性水平在2.1倍以内,表明这些赤拟谷盗品系对于敌敌畏的敏感性差异不大。12个赤拟谷盗品系来源于湖南省5个市5种不同的场所,推测湖南不同地区的赤拟谷盗品系对于敌敌畏的抗性水平较低,可以用敌敌畏来进行空仓熏蒸,以期达到理想的熏蒸效果。

 

3赤拟谷盗敌敌畏抗性测定结果

品系

LC50(95%置信限) g/L

回归方程

场所

相对系数

DCQ

0.051(0.048-0.053)

Y=12.249+9.448X

农户

1

JX

0.068(0.065-0.070)

Y=8.415+7.204X

饲料厂

1.3

STC

0.068(0.065-0.072)

Y=11.091+9.523X

农户

1.3

CK

0.071(0.066-0.075)

Y=12.635+10.977X

饲料厂

1.4

LBC

0.074(0.071-0.077)

Y=12.269+10.840X

农户

1.5

XW

0.076(0.073-0.079)

Y=11.957+10.679X

饲料厂

1.5

ML

0.077(0.074-0.081)

Y=10.404+9.355X

酒厂

1.5

HY

0.083(0.080-0.086)

Y=14.703+13.622X

加工厂

1.6

ZSK

0.089(0.087-0.090)

Y=15.714+14.926X

粮库

1.7

HH

0.104(0.100-0.107)

Y=15.039+15.300X

农户

微信二维码
扫码添加微信咨询
QQ客服:1663286777
电话:137-1883-9017
收到信息将及时回复