HPLC测定蒙药古日古木-13中羟基红花色素A的含量

李福全¹ ，楚伦巴特尔²（呼伦贝尔市蒙医医院 021008）

摘要：目的：用高效液相色谱(HPLC) 法测定古日古木-13味丸中羟基红花色素A

的含量。方法 ：采用Thermo—Cl8柱(4.6 x 250mm /5 um)为色谱柱; 以十八烷

基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-乙腈-0.7％磷酸溶液（26:2：72）为流动相；

检测波长为403nm；柱温为 30℃ ；结果： 本方法稳定，RSD%=0.83%。

结论：该方法测定结果准确可靠；可以作为古日古木-13质量控制的参考依据。

关 键词 ：蒙药;古日古木-13 ；羟基红花色素A ；

Determination of Hydroxysafflorin A in Mongolian Medicine Guri Ancient Wood-13 by HPLC

LI Fuquan ¹ , Chu- Lun –Bater ² (  Hulunbeier Mongolian Medical Hospital 021008  )

ABSTRACT: AIM To determine the hydroxy safflower pigment A in Guji Gumu-13wei Pill by high performance liquid chromatography (HPLC)The content. METHODS  Using a Thermo-Cl8 column (4.6 x 250 mm /5 um) as the column; The silane-bonded silica gel is a filler; the mobile phase is methanol-acetonitrile-0.7% phosphoric acid solution (26:2:72);The detection wavelength was 403 nm; the column temperature was 30 ° C; RESULTS  The method was stable, RSD% = 0.83%.CONCLUSION  The method is accurate and reliable; it can be used as a reference for the quality control of Guji Ancient Wood-13.

KEY  WORDS:  Mongolian medicine; ancient day ancient wood-13; hydroxy safflor pigment A;

蒙药古日古木-13味丸由：红花，丁香，莲子，麦冬，木香，诃子，川楝子，栀子，紫檀香，麝香，水牛角粉，牛黄，银朱等13味蒙药材组成；（此方中红花的比重为1:7）；具有清肝热，除“亚玛”病，解毒；主治肝热胸膈，配毒症，“亚玛”病，腰肾损伤，尿频，尿血；尤对血热引起的眼病有效。此方在《卫生部药

李福全（男）：主管药师，研究生，蒙药质量标准研究， E-mail:jichenghong99@126.com.

楚伦巴特尔（男）：主任医师（ 内蒙古自治区名蒙医，研究生导师 ）。

品标准蒙药分册》1998版上未记载质量检测^[1]，也尚未见报道此方质量检测项目；红花成为此方君药，具有锁脉，调经，清肝热，滋补强身，止痛，消肿功能；主治肝热，血热，月经不调，肝宝如病上下渗漏而吐血、便血，难产，外伤出血，血热性头痛，心热等症。近几年来红花的价格一直飙升 ，在蒙中药材市场屡见红花造假、以次充好的现象 ，影响到含红花蒙中成药的质量 。笔者采用高效液相色谱(HPLC)法测定蒙药古日古木-13味丸中红花的特征成分之一羟基红花色素A的含量，为完善该制剂的质量标准提供依据 。

1  仪器与试剂

1.1 仪器

Thermo Fisher U3000HPLC高效液相色谱系统( 美国赛默飞世儿公司 )，包含四元泵系，自动进样器。内置柱温箱，紫外-可见光检测器 ，赛多利斯科仪器（北京）有限公司万分之一分析天平  BSA124S 、十万分之一分析天平 BT25S  。          

1.2 试剂

甲醇（天津市协和吴鹏色谱科技有限公司）,乙腈（沈阳华东试剂厂）均为色谱纯；羟基红花色素A(批号 ：111637．96.5%，中国食品药品检定研究院）；红花（批号：1801183，安徽普仁）；蒙药古日古木-13味丸（呼伦贝尔市蒙医医院院制剂）

2 方法与结果

2.1 色谱条件及 系统适用性试验

色谱柱 ：Thermo—Cl8柱(250mm～4.6，5um)；流动相：以甲醇-乙腈-0.7％磷

酸溶液（26:2：72）；检测波长为403nm；柱温为 30℃ ；进样量 ：10ul 。分

别吸取对照品溶液 、供试品溶液。注人液相色谱仪 ，按照上述色谱条件进行分

析，结果显示羟基红花色素A，理论板数 6000。结果： 本方法稳定，RSD%=0.83%。

2.2 溶液的制备

2.2.1 对照品溶液的制备:  取羟基红花黄色素A对照品适量，精密称定，加25％甲醇制成每1ml中含0.13 mg的溶液，即得。

2.2.2供试品溶液的制备： 取本品粉末（过三号筛）约0.4g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入25%甲醇50ml，称定重量，超声处理（功率300W，频率50KHz）40分钟，放冷，再称定重量，用25％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2.3 精密度试验

精密吸取羟基红花黄色素A对照品溶液（0.13mg/ml),连续进样 5次 ，按“2.1”项下色谱条件注入液相色谱仪测定。计算测得羟基红花黄色素A,5次峰面积的 RSD为 0.83％;表明方法的精密度良好。

2.4检测结果

表1   羟基红花黄色素A峰面积

图-1羟基红花黄色素A                       图-2  红花供试品

图-3 古日古木-13

3 讨论

在红花中羟基红花黄色素A含量不得少于1.0%。^[2]本实验古日古木-13丸0.4038g中羟基红花黄色素含量0.20%，红花本方子中所占比重为1/7。经算此方中红花所含羟基红花黄色素A含量1.4% > 1.0%。至古日古木-13丸15g中羟基红花黄色素A含量不得少于0.02g. HPLC法测定此方含量，稳定可靠，易操作，可做此方质量控制依据。

参考文献：

[1] 国家卫生部药典委员会.《卫生部药品标准蒙药分册》：1998版[S].内蒙古科学技术出版社，1998：59.

[2] 国家药典委员会.《中华人民共和国药典》：2015版一部[S].北京：中国医药科技出版社，2015：151.