咖啡酰奎尼酸类物质研究进展

王鹏¹，张斯童¹，高俊鹏¹，孙晓仲²，陈光^*

（1，吉林农业大学生命科学学院，长春，130118；2，吉林省产品质量监督检查院，长春，130000）

摘要:咖啡酰奎尼酸类物质是一类天然的酚酸类化合物，在医药、化工、食品等领域都有广泛的应用，大量研究表明，咖啡酰奎尼酸类物质具有抗氧化、抗菌消炎、抑制肿瘤、活血降压、抗病毒、抗辐射等活性。本文将对咖啡酰奎尼酸类物质的组成结构、分离纯化、生物活性、及应用领域进行综述，以期为咖啡酰奎尼酸类物质的研究和应用提供理论依据。

关键词：咖啡酰奎尼酸；组成结构；分离纯化；生物活性

Research progress on caffeoyl quinic acid

Abstract：Caffeoyl quinic acid is a kind of natural phenolic acid and has been widely used in medicine, chemical and food industry, etc. A lot of research shows, Caffeoyl quinic acid has the activity of antioxidant, anti-inflammation, tumor inhibition, blood circulation and blood pressure lowering, anti-virus and anti-radiation. This paper reviewed the composition,isolation and purification, biological activity and application field，in order to provide theoretical basis for further research and application of Caffeoyl quinic acid.

Keywords：Caffeoyl quinic acid; composition;isolation and purification ; biological activity

咖啡酰奎尼酸类物质是一类天然的酚酸类化合物，由一个奎尼酸和不同数目的反式肉桂酸酯化缩合而成的，在植物体内有氧呼吸过程中经莽草酸（HMS）途径产生的苯丙素类物质之一，广泛存在于忍冬科忍冬属，菊科等高等双子叶植物中。研究表明，咖啡酰奎尼酸类物质具有抗氧化、抗菌消炎、抑制肿瘤、活血降压、抗病毒、抗辐射等生物学功能，成为近年来国内外专家学者研究的热点之一，本文将对咖啡酰奎尼酸类物质的结构、分离纯化、生物活性及应用进行综述。

1 咖啡酰奎尼酸的组成结构和在植物中的分布

1.1 咖啡酰奎尼酸的组成结构

1837年，Robiquet等首次在咖啡豆的研究中发现咖啡酰奎尼酸类物质，但当时还未有咖啡酰奎尼酸的概念^[1]，直到1846年Payen在描述咖啡豆中多酚类物质是才首次提出“咖啡酰奎尼酸”(Caffeoyl quinic acid)的概念^[2]，又经过一个世纪的探索，1947年Rudkin等确定了咖啡酰奎尼酸的结构，即奎尼酸与咖啡酸缩合成的酯，也就是现在的绿原酸^[3]。Clifford M N等研究分析确定，咖啡酰奎尼酸是一类由奎尼酸和不同数目的反式肉桂酸（包括咖啡酸、β-香豆酸或阿魏酸）通过酯化反应脱水缩合而成的酚酸类天然化合物^[4]，由于奎尼酸和反式肉桂酸的酯化反应的部位、形成酸酐数量和种类的差异，导致咖啡酰奎尼酸中包含有多种单体物质，按形成酸酐数量不同，通常将咖啡酰奎尼酸分为单取代咖啡酰奎尼酸、双取代咖啡酰奎尼酸、三取代咖啡酰奎尼酸和多取代咖啡酰奎尼酸，其中较为多见也是研究较多的就是单取代咖啡酰奎尼酸中3-O-咖啡酰奎尼酸(3-CQA )，即绿原酸。另外酯化的咖啡酰奎尼酸也属于咖啡酰奎尼酸类物质范畴，例如绿原酸甲酯（methy1-3-O-caffeoylquinic acid）、绿原酸乙酯（ethy1-3-O-caffeoylquinic acid），还有一些是咖啡酰奎尼酸类似物，如新绿原酸（5-caffeoylquinic acid,5）异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C等^[5]。

1.2 咖啡酰奎尼酸在植物中的分布

咖啡酰奎尼酸广泛存在于忍冬科忍冬属、菊科等高等双子叶植物和蕨类植物中，目前已从很多植物中分离出这种物质，其中含量较高的是在杜仲、甘薯叶、咖啡、花萱草、金银花、茶、葵花籽、棉菌陈、天山雪莲等植物中^[6]。在金银花和杜仲叶这两种中药中，绿原酸是主要有效成分之一，在杜仲叶中咖啡酰奎尼酸类物质可达5%-10%，在金银花中咖啡酰奎尼酸类物质可达4%-8%，主要是双取代咖啡酰奎尼酸，杜仲叶、金银花是我国研究咖啡酰奎尼酸类物质的主要原材料^{[7, 8]}。

单咖啡酰奎尼酸，通常是在奎尼酸的3位、4位和5位被反式肉桂酸取代的化合物，还有一些羧基酯化产物，在植物中广泛存在，在咖啡、花萱草、杜仲、茶、雪莲等植物中较多；双咖啡酰奎尼酸类广泛存在与菊科、豆科、伞形科等植物中，在杜仲、金银花、咖啡、甘薯、雪莲中常见。主要有1, 5-双咖啡酰奎尼酸(1,5-diCQA ) , 3,5-diCQA ,4,5-diCQA, 3,4-diCQA；三咖啡酰奎尼酸在自然界中比较少见，其中以3,4,5-三咖啡酰奎尼酸居多，目前可在甘薯的叶中、Lychnophora ericoides根和巴西蜂胶等天然产物中可以发现^[9-13]。

2 咖啡酰奎尼酸类物质的提取、分离和纯化

2.1 咖啡酰奎尼酸的提取方法

咖啡酰奎尼酸类物质的提取是通过物理或化学的方法，破坏植物细胞细胞壁和内部结构或者改变植物细胞渗透压的方式，将其中的咖啡酰奎尼酸类物质溶解到提取剂中，从而达到提取目的的过程，主要方法有水提法、有机溶剂提取法、酶解法、索氏提取法、超临界萃取法、超声波辅助法、微波辅助法、以及超高压提取法等，下面将对这些提取方法进行分别详细描述^[14]。

2.1.1 水提法

水提法是利用咖啡酰奎尼酸类物质能溶于水的性质，将水作为溶剂提取溶质中的咖啡酰奎尼酸类物质，近年来用热水煮沸来辅助提取是常用的提取方法。李杰等用水热法提取金银花中的绿原酸，筛选最佳提取条件，最终绿原酸得率3.60%，与预测值3.69%基本相似^[15]；杨敏等对苦丁茶中绿原酸进行水提工艺研究，经过条件优化筛选最优条件，绿原酸得率为1.63%^[16]；在传统水提取的基础上，何卫兵等通过预处理工艺提高热水提绿原酸的得率，优化预处理条件，绿原酸的得率可以达到5.43%^[17]。

2.1.2 有机溶剂提取法

有机溶剂提取法是利用咖啡酰奎尼酸是一种极性较强的酚酸类物质，易溶于甲醇、乙醇、乙腈等有机溶剂，来达到提取的目的。杨小峰等用乙醇回流法提取苹果中的绿原酸，优化条件，当乙醇浓度67%，提取苹果中绿原酸的达到最高值为2.780mg/g^[18]；邓爱华等研究杜仲叶中的绿原酸提取，通过响应面法优化条件，在最优条件下绿原酸的得率为0.8728%^[19]；付饶等通过有机溶剂提取法提取烟叶中的绿原酸，得到绿原酸的回收率为54.70%^[20]。

2.1.3 酶解法

利用酶（纤维素酶、果胶酶）对植物组织细胞进行处理，可以破坏植物的组织细胞结构，使细胞内的咖啡酰奎尼酸类物质自然流出，从而达到提取的目的。Torres-Mancera, M T等研究酶促提取咖啡果肉中的绿原酸，结果表明多种酶有协同作用，能显著提高绿原酸的提取率^[21]；林春梅等利用纤维素酶提取绿原酸，正交试验进行条件优化，最终绿原酸的提取率可以达到1.45%^[22]；在此基础上，石奇等用酶法辅助提取金银花中的绿原酸，优化提取条件，大大提高了绿原酸的得率，达到4.9%^[23]。

2.1.4 索氏提取法

索氏提取法是在索氏提取器中，利用有机溶剂循环往复提取待测样品，将咖啡酰奎尼酸从植物细胞中提取出来，从而达到提取目的。姜玉梅等利用索氏提取法提取金银花中的绿原酸，提取回流4次，绿原酸提取率高达2.18%^[24]；在次基础上，庞秀芬等利用超声辅助索氏提取的方法从忍冬果实中提取绿原酸，正交试验优化条件，最终忍冬果实中绿原酸的提取率为2.95%^[25]。

2.1.5 超临界萃取法

咖啡酰奎尼酸类物质的超临界萃取是指萃取剂在处于临界温度和临界压力或以上时，可以选择性的把不同物质分离并萃取出来。谭伟等研究了超临界CO₂提取葵粕绿原酸的影响因素，单因素确定在乙醇浓度70%、用量400ml/100g、温度50℃、压力30MPa、CO₂流量3.5L/h时效果最好，在此基础上，谭伟继续研究了超声辅助对超临界提取的影响，在超声辅助的条件下，可提高提取效率0.83%^[26]；李继睿等研究超临界流体萃取野菊花中绿原酸，优化条件，在以水为助提剂、压强25MPa、时间3 h、温度50℃的条件下，可以获得较高的得率^[27]。

2.1.6 超声波、微波辅助提取法

在超声波、微波的作用下，可以迅速破碎细胞和内部组织，使内部的咖啡酰奎尼酸类物质迅速扩散出来，溶解到溶剂中，完成提取。蒋益花等利用微波协同双水相提取甘薯叶中的绿原酸，正交试验条件优化得到，在乙醇溶液浓度40%、磷酸氢二钾浓度100mg/ml组合的双水相萃取体系中，微波提取时间75s、功率为320W条件下，绿原酸得率可达3.72%^[28]；尚宪超等研究超声波辅助深共熔溶剂提取山楂绿原酸，响应面法优化条件得到，当温度56℃、提取时间27 min、料液比21mg/ml的条件下，绿原酸提取率为4.845mg/g，纯度达到97.6%^[29]；在此基础上，康娜等研究超声波-微波协同提取桃花中绿原酸，优化条件，微波辐射功率300W，料液比1:25，乙醇浓度70%，辐射时间60min时，提取效率最高，为5.218%^[30]。

2.1.7 超高压提取法

超高压提取法是指在一定环境条件下，给材料增加一定的流体压强，在细胞内外压强平衡时迅速卸压，细胞内外渗透压迅速增到，使细胞内的咖啡酰奎尼酸类物质穿过膜，溶解到提取液中。秦霞等研究超高压提取菊花中绿原酸，优化最佳工艺条件，当乙醇浓度40%，超高压压力300MPa，时间5.5min时，绿原酸的得率达到0.46%^[31]；HU Wen等利用超高压技术来提取金银花中的绿原酸，当乙醇浓度为60%，萃取压力400mpa，时间2min，温度30℃，料液比1:50时，绿原酸的得率达到最高的4.86%^[32]。

分析咖啡酰奎尼酸的提取方法，水提法工艺较简单，但是纯度较低，周期较长；有机溶剂提取法工艺简单，纯度也略高于水提法，但是提取时间较长，有机溶剂的用量大；索氏提取法相当于有机溶剂提取法的升级版，摆脱了有机溶剂消耗大的问题，但是提取效率不够高；酶解法相对于前三种方法而言，纯度更高，提取率也高，但是生产成本较高，酶的用量大，成本高，对反应体系要求较高；超高压提取法的能大大缩短时间，相对提高效率，但是对仪器的要求较高，产业化生产较难；而超声波-微波辅助提取法的得率最高，效率也很高，操作也比较简单，但是对设备也有一定的要求^[33]。综上所述酶解法、超声波、微波辅助法体现出的效果较好，应用比较广泛，酶解法与超声辅助或微波辅助法结合应用表现出良好的应用前景^[34]。

2.2咖啡酰奎尼酸类物质的分离纯化方法

2.2.1 有机溶剂萃取分离法

利用有机溶剂对咖啡酰奎尼酸类物质的不同溶解度，使咖啡酰奎尼酸类物质达到分离纯化的目的。汪爱国等以水为流动相，乙酸乙酯为固定相，进行循环分离，萃取分离了金银花中的绿原酸和异绿原酸，分离纯化后纯度为64.1%和82.3%，回收率为85%和90%^[35]；胡佳钦等用双水相萃取金银花中的绿原酸，以丙酮/磷酸氢二钾为双水相体系，得到绿原酸含量为56.27%，收率为98.46%^[36]。

2.2.2 膜分离技术

利用膜的选择透过性，将不同分子量的物质进行分离，以达到分离纯化的目的。吴正奇等通过膜技术分离纯化绿原酸提取液，利用超滤膜和纳滤膜对咖啡酰奎尼酸类物质进行分离纯化，结果得到，纳滤浓缩液含绿原酸为17964mg/L，比原提取液提高了24.8倍，绿原酸的纯度由2.8%上升到27%，效果明显^[37]；范远景等用膜技术分离金银花绿原酸提取液，使用MF1-UF1-RO2膜组合处理效果最佳，其绿原酸回收率可达67.75%，产品纯度可达13.21%以上^[38]；韩润林等利用集成膜分离绿原酸，采用聚醚酰亚胺(PEI)超滤膜来纯化绿原酸，并通过季铵化壳聚糖/聚醚砜(HACC/PES)复合纳滤膜对其进行浓缩，最终对绿原酸的截留率可高达92%^[39]。

2.2.3 凝胶色谱法

凝胶色谱法是利用凝胶的分子筛效应，不同分子量的的物质扩散速度不同，从而分离不同分子量的物质。徐涛等采用亲脂性吸附树脂与葡聚糖凝胶色谱纯化金银花中绿原酸，结果显示所得的绿原酸纯度>98%^[40]；Kurata R等利用葡萄糖凝胶纯化甘薯叶中的绿原酸，回收率为66%，纯度为98%^[41]。

2.2.4 大孔吸附树脂法

大孔吸附树脂对大分子有吸附力，对咖啡酰奎尼酸类物质的吸附作用，在用易溶液相将其洗脱出来，以达到分离纯化的目的。郭秀秀等利用大孔树脂对绿原酸分离制纯，得到绿原酸的纯度为61.6，整个过程中绿原酸的率为48%，可用于工业化生产^[42]；陈光宇等闪式提取-大孔树脂吸附分离山银花中绿原酸，优化工艺条件，得到绿原酸的转移率为90.12%，最终绿原酸的纯度为50.3%^[43]；李慧敏等利用响应面法优化大孔树脂提纯杜仲绿原酸，绿原酸含量由纯化前134.5mg/g提高至纯化后341.2mg/g，提高了2.5倍^[44]。

2.2.5 高效液相色谱法

根据咖啡酰奎尼酸在固定相和流动相的非配系数不同，多次分配后达平衡时进行分离。Negishi等在较早的时候就开展了用HPLC法来分离咖啡酰奎尼酸类物质，并成功分离出单体，取得很好的效果^[45]；王晴川等利用高效液相色谱法分离苦丁茶中的咖啡酰奎尼酸类物质，通过半制备色谱可分离得到纯度95%以上的6种CQA类单体物质，平均加标回收率为96.34%，有效的分离出了咖啡酰奎尼酸类物质的单体^[46]；秦玉芝通过HPLC法比较分析，对绿原酸、4,5-O-咖啡酰基奎尼酸、3,5-O-咖啡酰基奎尼酸、3,4-O-咖啡酰基奎尼酸进行分离，加标回收率分别为:94.74%、102.63%、100.01%和101.05%^[47]。

综合分析来看，有机溶剂萃取分离法成本低、操作简单，但是得到纯度差；膜分离技术、大孔吸附树脂法得率高、量大，但操作周期长，步骤繁琐；凝胶色谱法纯度高，但是产量低。高效液相色谱法自动化程度高、产品浓度高，分离效果好、灵敏度高、可重复性好，是专家学者们应用最多的分离纯化技术^[48]。

3 咖啡酰奎尼酸的生物活性

3.1 抗氧化作用

咖啡酰奎尼酸的酚羟基易与自由基团反应，使其失活，表现为强抗氧化活性。Ooi, K L等在千年虫草中分离出3,4-二-O-咖啡酰奎尼酸物质，并对其功效活性进行研究，发现其具有强抗氧化活性、α-葡糖苷酶抑制作用、治疗癌症和糖尿病等生物活性^[49]；Hung T M在川续断中提取咖啡酰奎尼酸单体，并对其进行功效学研究，发现具有很好的清除自由基的功效^[50]；梁萱等人研究桃花中绿原酸的抗氧化活性，发现当绿原酸浓度为200µg/mL时，抗氧化活性为82.12%^[51]。

3.2 抗菌消炎作用

经研究表明，咖啡酰奎尼酸类物质对细菌、真菌都有较强的抑菌作用，可用于抑菌药的开发^[52]。王世宽等将绿原酸加入到发酵香肠中，发现其对乳杆菌、葡萄球菌、汉逊酵母、大肠杆菌有明显的抗菌作用^[53]；陈娜等人研究蒲公英中绿原酸的作用活性，研究证明绿原酸具有强抑菌性，能较好抑制金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的活性，来发挥抑菌作用^[54]。

3.3 抗癌抑制肿瘤作用

咖啡酰奎尼酸类物质通过抑制癌细胞增殖，促进癌细胞凋亡来发挥抑制肿瘤作用。杨晓丽等通过研究绿原酸抗肿瘤作用，表明绿原酸具有抗肿瘤作用，其对肺癌、肝癌、乳腺癌、鼻咽癌、宫颈癌、白血病等发病率较高的肿瘤均表现出较好的防治效果，其作用机制可能与其阻滞细胞生长周期、抑制肿瘤细胞增殖、诱导肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤血管生成、抑制转移、抑制端粒酶活性、调节免疫、逆转肿瘤细胞多药耐药等作用有关^[55]；江森等研究绿原酸联合吉西他滨对胰腺癌细胞增殖和凋亡的作用，发现联合应用能增强对胰腺癌细胞系PANC-1的增殖抑制和促凋亡作用，从而起到抑制肿瘤作用^[56]；田伟等对绿原酸诱导肺癌细胞凋亡进行了研究，发现绿原酸可以抑制A549的增殖和转移，促进细胞凋亡，其凋亡机制可能与细胞内活性氧组分的增多及APN、MMP-2活性降低有关^[57]。

3.4 降血压、调血脂作用

咖啡酰奎尼酸类物质可以改变机体内消化酶结构和酶蛋白的天然构象来抑制酶的活性，从而起到降血脂、抗肥胖、调血糖的作用。Cho等发现在肥胖小鼠的食物中添加绿原酸，小鼠血液肝脏中的甘油三酯和胆固醇水平显著降低，说明其具有调节脂代谢的作用^[58]；Ong等研究发现绿原酸类物质可以调节小鼠肝脏细胞的葡萄糖耐受性和胰岛素敏感性从而改善肝脏的糖异生和脂质代谢，绿原酸类物质长期作用小鼠可以抑制G6pase的活性，进而减弱肝细胞的病变和血脂水平，其机制与激活AMPK有关^[59]；朱艳萍等研究绿原酸对高脂饮食诱导的肥胖小鼠的作用，通过测定小鼠血液及肝脏中脂质指标的情况、小鼠脂代谢相关基因和mRNA表达量，得出咖啡碱+绿原酸的减肥作用可能通过调节肝脏脂质代谢相关基因的表达来降低血和肝脏中脂类的含量，抑制脂肪沉积^[60]；另外，对于消化酶的体外抑制作用，专家学者也进行了充分的研究，李世升等研究金银花绿原酸提取物对α-葡萄糖苷酶的体外抑制作用，表明能抑制α-葡萄糖苷酶的活性，效果良好^[61]；徐冬兰等通过荧光光谱法和圆二色谱法研究咖啡酰奎尼酸类物质与α-淀粉酶的相互作用特性，结果表明咖啡酰奎尼酸的结合引起ɑ-淀粉酶二级结构的变化,破坏酶蛋白的天然构象,从而降低了酶的催化活性^[62]。

3.5 抗乙肝抗病毒作用

经研究表明，咖啡酰奎尼酸类物质能够抑制神经酰胺酶的活性，从而体现出抗病毒活性^[63]。Kwon, H C等在很早的时候就曾测出咖啡酰奎尼酸类物质的抗病毒活性^[64]；Wang等研究发现绿原酸类物质可以显著地抑制乙型肝炎病毒的活性，起到很好的抗病毒作用^[65]；Urushisaki等研究表明，咖啡酰奎尼酸能够升高白细胞含量，抑制流感病毒，抑制HTLV-1、HIV-1等病毒感染，并对流感感染后的细胞有保护作用。

3.6 抗辐射保护作用

咖啡酰奎尼酸能够增强辐射损伤老化的细胞活性，提高细胞内超氧化物歧化酶活力，降低细胞内丙二醛含量来达到抗辐射作用^[66]。Cinkilic N等通过研究绿原酸的抗辐射作用，表明绿原酸抗辐射作用明显，可明显减少X-射线对人体淋巴细胞的DNA损伤，损伤降低幅度为6%-54%^[67]；Nilufer等研究发现，咖啡酰奎尼酸具有辐射防护作用，可显著降低X-射线引起的细胞DNA损伤，损伤降低幅度为5.99%-53.57%^[68]。

4 咖啡酰奎尼酸的应用领域

4.1 在食品行业应用

咖啡酰奎尼酸具有良好的抗氧化活性，可以良好的运用到食品行业，在保障食品安全的基础上，对食品进行更好的储存。Luo, J等通过研究AtMYB12对于黄酮醇、咖啡酰奎尼酸物质的激活作用，设计改善代谢物积累和食物抗氧化能力提供非常大的参考作用^[69]；姜微波，曹建康等，研究绿原酸对油桃、苹果果实成熟衰老调控，表明绿原酸可以显著降低油桃在贮藏期间的乙烯释放量、呼吸速率、软化程度、腐烂率和丙二醛含量等来延缓果实的衰老，为绿原酸在此方面的应用奠定前景^[70]。

4.2 在医药保健品行业应用

咖啡酰奎尼酸具有降血糖，降血脂，清热解毒、抗菌消炎等方面的生物活性，在医药保健行业得到广泛利用。张琼光等通过苦丁茶中异绿原酸对实验性2型糖尿病小鼠的降血糖作用研究，表明苦丁茶中异绿原酸能够显著改善糖尿病小鼠血清血糖、血脂相关指标，同时抑制小鼠肝脏的脂肪聚集，能显著改善糖尿病小鼠的糖脂代谢紊乱，可以拓展到对糖尿病患者的抑病治疗^[71]；张学东等研究发现蒲地蓝消炎口服液中咖啡酸的含量为1.64%，说明咖啡酰奎尼酸运用到医药品行业的应用前景^[72]；杨辉等通过研究绿原酸调节肥胖大鼠胰岛素抵抗作用，证明绿原酸类物质具有调节肥胖大鼠IR的作用，其机制与抑制内脏脂肪聚积,降低体内肝糖原、肌糖原水平，促进外周组织吸收利用葡萄糖，降低血清游离脂肪酸(FFA)水平，防止脂质过氧化有关^[73]。

4.3 化工领域

咖啡酰奎尼酸的抑菌、抗氧化活性及降低紫外线的辐射伤害等在化工日常领域可以得到利用。符莎露研究绿原酸接枝明胶制备新型水产品生物保鲜剂，将CGA-Gel接枝物与微冻保鲜技术结合对哈氏仿对虾进行涂膜保鲜，可以有效抑制细菌的滋生并延缓蛋白的分解和脂质的变性，有效保藏水产品^[74]。另外，利用其抗氧化和抗辐射作用，也可以运用到护发产品和化妆品行业，可以起到美白、延缓衰老、抗辐射等作用。

4.4 动物养殖领域

利用咖啡酰奎尼酸类物质抗氧化、抗肥胖、调血脂等生物活性，可运用到动物养殖等领域^[75]。杨天俊等通过研究高脂饲料中添加绿原酸对草鱼生长性能和脂质代谢的影响，结果表面咖啡酰奎尼酸类物质可促进草鱼机体脂质代谢，改善生长性能，从而改变草鱼的肉质比例，增加肉质口感^[76]。

5 前景展望

随着对咖啡酰奎尼酸类物质研究的不断深入，证实其具有多种生物活性，其应用领域也得到了较大的扩展，但还存在着较大的研究和应用潜在价值，主要表现在：（1）探索简便高效的咖啡酰奎尼酸类物质提取纯化工艺；（2）从细胞和分子水平深入研究咖啡酰奎尼酸类单体物质表现多种生物活性的机制；（3）基于多种生物学活性的功能产品及化工产品的开发。期待通过对其提取纯化工艺、作用机制的探索和研究，开发和应用系列功能产品和化工产品的，实现这种天然植物提取物的资源化利用。

参考文献

 [1] Robiquet. Ueberden Caffee[J]. Annalen der Pharmacie,1837,23(1):93-95.

 [2] Clifford M N.Chlorogenic acids and other cinnam ates-nature.occunence and dietary burden[J].science of food Agriculture,1999,79(3):362-372.

 [3] Shamanthakas M C,Narasinga R M S.Binding of  Chlorogenic acid by the isolated polyphenol-free 11s protein of sumflower(helian thus annuus)seed[J].Agriculture food and Chemistry,1990,38(12);2103-2110.

 [4] Clifford  M  N,Wu W,Kuhnert  N.The chlorogenic acids of Hemerocallis[J].Food Chemistry,2006,95(4):574一578.

 [5] 王玲娜, 姚佳欢, 马超美. 绿原酸的研究进展[J]. 食品与生物技术学报, 2017(11):1121-1130.

 [6] 王丽萍, 郭栋, 王果, 等. 中药绿原酸的研究进展[J]. 时珍国医国药, 2011(04):961-963.

 [7] 兰小艳, 张学俊, 龚桂珍. 杜仲叶中绿原酸的研究进展[J]. 中国农学通报, 2009(21):86-89.

 [8] 谢碧秀, 孙智达. 金银花中主要有机酸的研究进展[J]. 现代食品科技, 2007(09):93-97.

 [9] AlGamdi N, Mullen W, Crozier A. Tea prepared from Anastatica hirerochuntica seeds contains a diversity of antioxidant flavonoids, chlorogenic acids and phenolic compounds[J]. Phytochemistry, 2011,72(2-3):248-254.

[10] Islam M S, Yoshimoto M, Terahara N, et al. Anthocyanin compositions in sweetpotato (Ipomoea batatas L.) leaves[J]. Biosci Biotechnol Biochem, 2002,66(11):2483-2486.

[11] Clifford M N, Wu W, Kirkpatrick J, et al. Profiling the chlorogenic acids and other caffeic acid derivatives of herbal chrysanthemum by LC-MSn[J]. J Agric Food Chem, 2007,55(3):929-936.

[12] 谢旻皓, 王晴川, 徐冬兰, 等. 苦丁茶冬青苦丁茶提取物与3,5-双咖啡酰奎尼酸对肠道微生物体外发酵的影响[J]. 食品科学, 2015(17):124-129.

[13] 范金波, 蔡茜彤, 冯叙桥, 等. 绿咖啡豆提取物的抗氧化性研究[J]. 食品工业科技, 2014(09):72-77.

[14] 孙阳, 黄和, 胡燚. 绿原酸提取纯化方法的研究进展[J]. 化学试剂, 2017(03):257-262.

[15] 李杰, 陈道鸽, 王兵兵, 等. 水热法提取金银花中绿原酸的工艺研究[J]. 食品研究与开发, 2018(02):62-67.

[16] 杨敏, 时庆欣, 王玄源, 等. 苦丁茶中绿原酸的水提工艺研究[J]. 湖北中医药大学学报, 2017(03):30-33.

[17] 何卫兵. 预处理工艺对热水提取绿原酸提取率的影响[J]. 新疆化工, 2017(Z1):5-7.

[18] 杨小峰. 乙醇回流法提取苹果中绿原酸的工艺研究[J]. 河北北方学院学报(自然科学版), 2017(03):6-11.

[19] 邓爱华, 李红勇, 谢鹏, 等. 响应面法优化杜仲叶中绿原酸提取工艺[J]. 经济林研究, 2018(01):125-130.

[20] 付饶, 周迎春, 陈轶男, 等. 烟叶中有效成分绿原酸的提取[J]. 安徽化工, 2018(02):49-50.

[21] Torres-Mancera M T, Baqueiro-Pena I, Figueroa-Montero A, et al. Biotransformation and improved enzymatic extraction of chlorogenic acid from coffee pulp by filamentous fungi[J]. Biotechnol Prog, 2013,29(2):337-345.

[22] 林春梅, 周鸣谦. 正交试验优化纤维素酶法提取牛蒡根皮中绿原酸工艺[J]. 食品科学, 2013(06):64-67.

[23] 石奇. 酶辅助提取金银花中绿原酸与多糖的工艺研究[J]. 应用化工, 2015(07):1268-1271.

[24] 姜玉梅. 金银花中绿原酸的提取工艺[J]. 云南化工, 2010(06):13-15.

[25] 庞秀芬, 段若依, 赵青, 等. 超声辅助索氏提取忍冬果实中绿原酸的工艺优化[J]. 生物资源, 2017(02):125-129.

[26] 谭伟, 丘泰球, 张焜, 等. 超声场对超临界CO_2萃取葵粕绿原酸的影响[J]. 精细化工, 2009(10):978-981.

[27] 李继睿, 禹练英, 杨孝辉, 等. 超临界流体萃取野菊花中绿原酸工艺研究[J]. 食品研究与开发, 2012(09):30-32.

[28] 蒋益花, 蒋新龙. 甘薯叶绿原酸的微波协同双水相提取及其抗氧化活性[J]. 中国粮油学报, 2018(08):94-100.

[29] 尚宪超, 谭家能, 杜咏梅, 等. 超声波辅助深共熔溶剂提取山楂绿原酸的工艺优化[J]. 食品科技, 2018(09):285-289.

[30] 康娜, 梁永锋. 超声波-微波协同提取桃花中绿原酸工艺的优化[J]. 中国中医药科技, 2018(02):225-226.

[31] 秦霞, 靳学远, 刘红. 菊花中绿原酸的超高压提取工艺研究[J]. 湖北农业科学, 2010(09):2215-2217.

[32] HU W, GUO T, JIANG W, et al. Effects of ultrahigh pressure extraction on yield and antioxidant activity of chlorogenic acid and cynaroside extracted from flower buds of Lonicera japonica[J]. Chinese Journal of Natural Medicines, 2015(06):445-453.

[33] 潘婉莲, 赵苗, 袁芳, 等. 我国天然产物绿原酸活性及提取工艺研究进展[J]. 食品安全质量检测学报, 2017(11):4269-4276.

[34] 徐树来, 金慧荣, 任红波, 等. 酶解-超声组合提取蒲公英中绿原酸的工艺优化[J]. 食品工业科技, 2018(08):160-166.

[35] 汪爱国, 陈福明, 李旭宁, 等. 绿原酸和异绿原酸的螺旋管分馏萃取分离[J]. 中国医药工业杂志, 2011(01):25-28.

[36] 胡佳钦, 向福, 石长萍, 等. 金银花中绿原酸的双水相萃取及抗氧化能力研究[J]. 中国酿造, 2015(12):109-112.

[37] 吴正奇, 凌秀菊, 石勇, 等. 膜技术分离纯化绿原酸提取液的研究[J]. 食品科学, 2007(11):227-231.

[38] 范远景, 马凌云, 徐晓伟, 等. 膜技术分离金银花绿原酸提取液工艺研究[J]. 食品科学, 2010(20):43-46.

[39] 韩润林. 集成膜技术在绿原酸分离中的应用研究[J]. 塑料科技, 2014(04):66-69.

[40] 徐涛, 潘见. 金银花中绿原酸的分离纯化[J]. 阜阳师范学院学报(自然科学版), 2005(01):8-10.

[41] Kurata R, Yahara S, Yamakawa O, Yoshimoto M. Simple Highyield Purification of 3,4,5-Tri-0-caffeoylquinic Acid from Sweet potato (lpomoea batatas L.) Leaf and lts lnhibitory Effects on Aldose Reductase[J]. Food Science and Technology Research, 2011,17(2):87-92.

[42] 郭秀秀, 杨兴永. 绿原酸大孔树脂分离制纯工艺[J]. 中国科技信息, 2017(07):42-44.

[43] 陈光宇, 葛发欢, 何群, 等. 闪式提取-大孔树脂吸附分离山银花中绿原酸的工艺研究[J]. 中国药师, 2018(06):997-1002.

[44] 李慧敏, 牛东攀, 陈丹阳, 等. 响应面法优化大孔树脂纯化杜仲绿原酸工艺研究[J]. 食品研究与开发, 2018(13):40-46.

[45] Negishi O, Negishi Y, Yamaguchi F, et al. Deodorization with ku-ding-cha containing a large amount of caffeoyl quinic acid  derivatives[J]. J Agric Food Chem, 2004,52(17):5513-5518.

[46] 王晴川, 张鑫, 张文芹, 等. 苦丁冬青苦丁茶中咖啡酰奎尼酸类物质的分离纯化和高效液相色谱法分析[J]. 食品科学, 2013(22):119-122.

[47] 秦玉芝, 付鹏飞, 全华, 等. 甘薯中咖啡酰奎尼酸类化合物的HPLC法比较分析（英文）[J]. Agricultural Science & Technology, 2016(12):2734-2737.

[48] 席利莎, 木泰华, 孙红男. 绿原酸类物质的国内外研究进展[J]. 核农学报, 2014(02):292-301.

[49] Ooi K L, Muhammad T S, Tan M L, et al. Cytotoxic, apoptotic and anti-alpha-glucosidase activities of 3,4-di-O-caffeoyl quinic acid, an antioxidant isolated from the polyphenolic-rich extract of Elephantopus mollis Kunth[J]. J Ethnopharmacol, 2011,135(3):685-695.

[50] Hung T M, Na M, Thuong P T, et al. Antioxidant activity of caffeoyl quinic acid derivatives from the roots of Dipsacus asper Wall[J]. J Ethnopharmacol, 2006,108(2):188-192.

[51] 梁萱, 李嘉会, 梁永锋. 桃花中绿原酸抗氧化活性的研究[J]. 中国现代中药, 2018(06):697-701.

[52] 胡居吾, 韩晓丹, 付建平, 等. 三种绿原酸提取物的抑菌和抗氧化效果比较[J]. 天然产物研究与开发, 2017(11):1928-1933.

[53] 王世宽, 谢仁有, 洪玉程. 甘薯叶绿原酸的抑菌作用及其复配型防腐剂对发酵香肠的影响[J]. 四川理工学院学报(自然科学版), 2012(04):21-25.

[54] 陈娜, 王冬雪, 王雪娟, 等. 蒲公英中绿原酸提取及抑菌活性研究[J]. 海峡药学, 2016(12):16-19.

[55] 杨晓丽, 张君利, 王京峰, 等. 绿原酸抗肿瘤作用及机制研究进展[J]. 中国实验方剂学杂志, 2018(19):229-234.

[56] 江森, 郑希, 何燕, 等. 绿原酸联合吉西他滨对胰腺癌细胞增殖和凋亡的影响[J]. 中药材, 2018(02):446-450.

[57] 田伟, 豆亚伟, 王宏涛, 等. 绿原酸诱导肺癌细胞凋亡及其机制研究[J]. 解放军预防医学杂志, 2016(06):854-857.

[58] Cho A S, Jeon S M, Kim M J, et al. Chlorogenic acid exhibits anti-obesity property and improves lipid metabolism in  high-fat diet-induced-obese mice[J]. Food Chem Toxicol, 2010,48(3):937-943.

[59] Ong K W, Hsu A, Tan B K. Anti-diabetic and anti-lipidemic effects of chlorogenic acid are mediated by ampk activation[J]. Biochem Pharmacol, 2013,85(9):1341-1351.

[60] 朱艳萍, 杨丽聪, 林乐珍, 等. 咖啡碱和绿原酸对高脂饮食小鼠体质量、脂类沉积及肝脏脂质代谢基因表达的影响[J]. 食品科学, 2017(09):162-167.

[61] 李世升, 杨报, 向福, 等. 金银花绿原酸提取物对α-葡萄糖苷酶的体外抑制作用[J]. 基因组学与应用生物学, 2017(08):3096-3102.

[62] 徐冬兰, 王晴川, 曾晓雄, 等. 苦丁冬青苦丁茶咖啡酰奎尼酸类物质与α-淀粉酶的相互作用特性[J]. 食品科学, 2016(13):6-12.

[63] Karar M E, Merk D R, Falk V, et al. A simple and accurate method for computer-aided transapical aortic valve replacement[J]. Comput Med Imaging Graph, 2016,50:31-41.

[64] Kwon H C, Jung C M, Shin C G, et al. A new caffeoyl quinic acid from aster scaber and its inhibitory activity against  human immunodeficiency virus-1 (HIV-1) integrase[J]. Chem Pharm Bull (Tokyo), 2000,48(11):1796-1798.

[65] Wang G F, Shi L P, Ren Y D, et al. Anti-hepatitis B virus activity of chlorogenic acid, quinic acid and caffeic acid in vivo and in vitro[J]. Antiviral Res, 2009,83(2):186-190.

[66] 李建民, 宋丽艳, 陈巧云, 等. 绿原酸对紫外线致ESF-1细胞光老化保护作用的研究[J]. 中医药信息, 2013(04):25-27.

[67] Cinkilic N, Cetintas S K, Zorlu T, et al. Radioprotection by two phenolic compounds: chlorogenic and quinic acid, on X-ray  induced DNA damage in human blood lymphocytes in vitro[J]. Food Chem Toxicol, 2013,53:359-363.

[68] Nilufer D, Boyacioglu D, Vodovotz Y. Functionality of soymilk powder and its components in fresh soy bread[J]. J Food Sci, 2008,73(4):C275-C281.

[69] Luo J, Butelli E, Hill L, et al. AtMYB12 regulates caffeoyl quinic acid and flavonol synthesis in tomato: expression in fruit results in very high levels of both types of polyphenol[J]. Plant J, 2008,56(2):316-326.

[70] 奚宇.绿原酸对油桃和苹果果实采后成熟衰老的调控作用[D]. 中国农业大学, 2017.

[71] 张琼光, 王玄源, 时庆欣, 等. 苦丁茶中异绿原酸对实验性2型糖尿病小鼠的降血糖作用研究[J]. 时珍国医国药, 2017(06):1303-1305.

[72] 张学东, 张宜欣, 刘永红, 等. 反相高效液相色谱法测定蒲地蓝消炎口服液中绿原酸和咖啡酸的含量[J]. 中国卫生检验杂志, 2016(05):668-669.

[73] 杨辉, 周远大, 何海霞. 绿原酸调节肥胖大鼠胰岛素抵抗作用的研究[J]. 重庆医学, 2015(18):2457-2460.

[74] 符莎露.绿原酸接枝明胶制备新型水产品生物保鲜剂的研究[D]. 浙江大学, 2017.

[75] 杨岸奇, 李朝晖, 张善文. 异绿原酸在畜牧生产的应用前景[J]. 湖南饲料, 2017(04):46-48.

[76] 杨天俊, 陈彦良, 刘文舒, 等. 高脂饲料中添加绿原酸对草鱼生长性能和脂质代谢的影响[J]. 动物营养学报, 2018(08):3219-3228.

地址：吉林省长春市南关区新城大街2888号，吉林农业大学