用小的优点，在美国已为广泛使用的犬用环氧酶-2抑制剂。

目前，德拉昔布咀嚼片并未在我国上市，关于德拉昔布体外溶出度实验，笔者并未见国内外有所文献报导，而溶出度是评价片剂的重要质量标准，且许多溶出度测定法都采用紫外——分光光度法进行含量测定^[9]，而本实验应用HPLC建立了准确性与灵敏度更高，专属性更强的方法来检测德拉昔布的体外溶出度，为今后药典上关于德拉昔布溶出度的标准提供重要参考。

2.仪器与试剂

仪器：Waters e2695高效液相色谱系统（美国Waters公司），Waters 2998 紫外检测器（美国Waters公司），AL 204 电子分析天平（梅特勒-托利多仪器公司），PB-10酸度计（德国Sartorius 公司）RCZ-6B3智能药物溶出仪（上海黄海药检仪器厂），KQ-100E型超声波清洗仪（昆山超声仪器有限公司）

试剂：乙腈（色谱纯，美国Sigma-aldrich公司），甲醇（色谱纯，山东禹王和天下材料有限公司），十二烷基硫酸钠（分析纯，天津致远化学试剂有限公司），Deracoxib标准品（北京Absin公司，CAS号：169590-41-4），磷酸二氢钾（分析纯，西陇科学有限公司），磷酸氢二钾（分析纯，天津科密欧化学试剂有限公司），盐酸（分析纯，哈尔滨理工化学试剂有限公司），德拉昔布咀嚼片（实验室自制，规格：20mg，批号：20180507，20180514，20180521）。

3.方法

3.1溶液配制  

3.1.1对照品溶液配制

精密称定德拉昔布标准品2.5mg，用1ml甲醇溶解，加0.9%十二烷基硫酸钠溶液定容至100ml，制成每1ml含德拉昔布标准品0.025mg的溶液，作为对照品。

3.1.2供试品溶液配制

取标示量为20mg的德拉昔布咀嚼片，碾碎，用0.9%十二烷基硫酸钠将其溶解并定容至250ml，制成每1ml含0.08mg德拉昔布的溶液作为供试品母液，取2.5ml供试品母液定容至10ml作为供试品。

3.2溶出方法的选择

根据中国兽药典2015年第一部关于溶出度的内容，德拉昔布咀嚼片为片剂，选择浆法，转速为50 r/min，溶出温度为37℃。

4.结果

4.1溶出介质选择

德拉昔布属于难溶性药物，因此采用了不同的溶出介质进行考察，分别为水、0.1mol·L^-1盐酸、磷酸盐缓冲液（pH6.8）、磷酸盐缓冲液（pH7.4）和0.9%十二烷基硫酸钠。于30分钟取样检测溶出度。结果见表1，表明德拉昔布在水，盐酸，磷酸盐缓冲液（pH6.8），磷酸盐缓冲液（pH7.4）中不能完全溶出，在0.9%十二烷基硫酸钠溶液中溶出良好，因此采用0.9%十二烷基硫酸钠溶液作为溶出介质。

表1 德拉昔布在不同介质中的溶出度结果

Table 1  The results of dissolution of deracoxib in different solution

4.2色谱条件系统适应性

 色谱柱为Waters X Select H88 C18(5μm，4.6*250mm）；流动相：磷酸盐缓冲液（pH=4.5）：乙腈 （52:48）；检测波长252nm；流速1ml·min^-1 ;柱温30℃。杂峰与主峰的分离度应大于1.5，理论塔板数不低于8000，拖尾因子应符合要求。

4.3专属性

按德拉昔布咀嚼片处方（不含主药德拉昔布，用等量淀粉代替）压出空片，充分粉碎，取适量0.9%十二烷基硫酸钠溶液溶解，按3.1.2的方法制成空白辅料溶液，结果如图1-1，1-2，所示，德拉昔布峰在10.9min左右出峰，空白辅料与溶剂峰不会对德拉昔布主峰产生干扰

图1-1 空白辅料液相色谱图

Fig1-1 Liquid chromatogram of blank excipients

图1-2德拉昔布咀嚼片溶出度液相色谱图

Fig 1-2 Liquid chromatogram of the dissolution of deracoxib chewable tablets

4.4线性关系

按方法3.1.1配制好溶液，分别取1ml，2ml，4ml，6ml，8ml，10ml以0.9%十二烷基硫酸钠定容至10ml容量瓶中，制成0.0025mg/ml，0.005mg/ml，0.01mg/ml，0.015mg/ml，0.02mg/ml，0.025mg/ml的一系列浓度溶液，经0.55μm滤膜，过滤，取10μl注入HPLC，记录色谱图与峰面积，以峰面积A为纵坐标，进样浓度C为横坐标建立标准曲线，得线性回归方程：A=31237C+9.6559（R²=0.9992），表明在0.9%十二烷基硫酸钠溶液中，德拉昔布的浓度在0.0025-0.025mg/ml之间时，峰面积与浓度成良好的线性关系。

4.5回收率

取标示量20mg德拉昔布咀嚼片9片，按照3.1.2的方法配制样品，每3份精密加入相当于样品含量80%，100%，120%的德拉昔布标准品，HPLC测得平均回收率100.73%，RSD为1.01%。

4.6溶液稳定性

随机选取标示量20mg 德拉昔布咀嚼片6片按方法3.2.2配制样品，分别在0h，2h，4h，6h，8h取样，取10μl注入HPLC测定含量，其平均含量分别为101.21%，100.82%，99.99%，100.92%，100.78%,RSD为0.45%，表明德拉昔布在0.9%的十二烷基硫酸钠溶液中8h内稳定。

4.7均一性

随机选取批次20180514中标示量为20mg的德拉昔布咀嚼片6片测定溶出度，结果见图2，其中6片咀嚼片在5min，10min，15min，20min，30min，40min，50min的溶出度RSD分别为6.66%，5.48%，6.07%，6.02%，6.21%，6.02%，5.97%。

图2 德拉昔布咀嚼片体外溶出度均一度实验结果

Fig 2  The result of uniformity test of dissolution of deracoxib

4.8重现性

对三批不同批次的德拉昔布咀嚼片各6片进行溶出度测定，考察不同批次咀嚼片的溶出度重现性。结果如图3所示，其中5min，10min，15min，20min，30min，40min，50min的平均溶出度RSD为0.91%，1.44%，2.44%，0.18%，0.94%，1.46%，0.73%，重现性良好。

图3 不同批次德拉昔布咀嚼片体外平均溶出度重现性结果

Fig 3 The ruggedness result of the average dissolution of different batches deracoxib chewable tablets

4.9三批样品的溶出度测定

取三批样品20180507，20180514，20180521各6片，按《中国药典2015版》溶出度测定法第二法浆法，以900ml 0.9%十二烷基硫酸钠为溶出介质，溶出温度为37℃。分别在5min，10min，15min，20min，30min，40min，50min采样1mL，经0.55μm滤膜过滤，取10μl注入HPLC，色谱柱：Waters X Select H88 C18(5μm，4.6*250mm）;流动相：磷酸盐缓冲液PH4.5:乙腈（52:48）；流速：1mL/min^-1；检测波长：252nm;柱温：30℃。按《中国人民共和国药典2015版》^[10]规定片剂溶出度在30min内应达到70%以上，三批样品30min的平均溶出度分别为89.50%，87.94%，89.24%，且没有单片溶出度低于80%，均符合药典要求。

5. 讨论

溶出介质的选择：德拉昔布属于难溶性药物，溶出介质的选择至关重要，本实验共评价了水、0.1mol·L^-1盐酸、磷酸盐缓冲液（PH6.8）、磷酸盐缓冲液（PH7.4）和0.9%十二烷基硫酸钠五种溶出介质，其中德拉昔布在0.9%十二烷基硫酸钠溶液中溶出度最大，因此选其为溶出介质。此外，谢沐风^[11]的研究建议溶出介质体积900ml，与人体消化道液体总量接近，从而确定了溶出介质的种类与体积。

检测方式的选择：大多数溶出度检测方式都选择紫外——分光光度法，本实验选择了专属性与灵敏度更高的HPLC法进行检测，根据前期实验所建立的HPLC法检测德拉昔布咀嚼片的色谱条件，确定了HPLC法检测德拉昔布溶出度的检测条件，色谱柱：Waters X Select H88 C18(5μm，4.6*250mm）;流动相：磷酸盐缓冲液PH4.5:乙腈（52:48）；流速：1mL/min^-1；检测波长：252nm；柱温：30℃。其专属性良好，德拉昔布主峰的理论板数，拖尾因子，分离度均符合药典要求，可以用于德拉昔布咀嚼片体外溶出度的测定。

溶出度是评价片剂质量标准的重要指标，是模拟片剂及其他固体制剂在体内胃肠道溶出与崩解的体外实验，而德拉昔布作为一种难溶性药物，根据药典规定其口服制剂必须设置溶出度检查项目。药物在体内需经崩解，溶出才能被机体吸收，发挥作用，因此药物需在规定时间内溶出一定程度才能发挥良好的药效，是评价药物制剂的重要依据。但目前，大多数溶出度都选择了专属性差，灵敏度低的紫外分光光度进行测定，而本实验建立了专属性强，灵敏度与准确度更高的HPLC法来测定德拉昔布咀嚼片的体外溶出度，通过线性关系，回收率，稳定性，均一度，重现性进行了方法学验证，为今后药典关于德拉昔布溶出度的质量标准提供了重要参考。

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[11] 谢沐风. 如何科学、客观地制订溶出度试验质量标准[J]. 中国医药工业杂志, 2012,43(3): 89-98.