我院160例不规则抗体筛查阳性结果的回顾性分析

   杨静 吴艳红 何屹 袁红 

四川省人民医院输血科

【摘要】目的: 通过对本院160例血型不规则抗体筛查阳性结果的回顾性分析，以探讨血型不规则抗体的特异性分布及血清学实验方法。方法: 选择2016年1月1日－ 2017年9月1日在本院拟输血的患者，筛查其血浆中不规则抗体，并对筛查阳性标本采用血清学实验方法进行抗体特异性鉴定。结果: 45360例患者中不规则抗体阳性者160 例，阳性率为0.35%。在160例阳性中Ｒh 血型系统66例( 41.25%)。结论:不规则抗体筛查和鉴定在交叉配血实验之前进行，对确保输血安全是非常必要的，有利于患者抗体的早期确认及鉴定临床上具有意义的抗体，避免一些异常情况而造成病情的延误。

【关键词】不规则抗体鉴定; 血清学试验; 输血安全

不规则抗体通常指规则产生的抗-A 和抗-B 以外的血型抗体，这些抗体会干扰血型鉴定及交叉配血等试验。主要经输血或妊娠等免疫产生，是引起溶血性输血反应、新生儿溶血病、造成血型鉴定困难及交叉配血困难的主要因素之一。随着医疗技术的发展，血型鉴定方法已具有极高的灵敏度，大大减少了ABO 血型鉴定误差引起的速发型溶血反应的发生; 然而，由于不规则抗体引起的输血后迟发型溶血反应还时有发生。输血前对受血者进行不规则抗体的筛查和鉴定，尤其对有输血史、妊娠史及短期内反复多次输血患者筛检出有临床意义的抗体，选择相应抗原阴性、交叉配血相合的红细胞输注，对有效减少或避免溶血性输血反应的发生，保证临床输血安全具有重要意义。

材料和方法

一般资料  　选取本院自2016年1月1日－ 2017 年9月1日申请输血的住院患者45360例作为研究对象。查阅患者输血病例，并获得患者相关信息

仪器和试剂 　抗Ａ,抗Ｂ，抗Ｄ，Ｒｈ血型分型试剂，多特异性抗球蛋白试剂，凝聚胺试剂，抗体筛选细胞、抗体鉴定谱细胞等均由上海血液生物医药有限责任公司提供; 抗人球蛋白微柱凝胶卡由美国强生公司提供；强生全自动血型仪

方法　　抗体筛选及鉴定采用了盐水法、间接抗球蛋白法、凝聚胺法及微柱凝集法，均按试剂说明书操作。

结果　　45360例拟输血的患者中不规则抗体筛查阳性的患者为160例，阳性比例为0.35%。在160例中其中男性48例，女性112 例。多见消化科，血液科，肾内科，风湿科、妇产科等科室。有输血史或妊娠史的151例，无输血史或妊娠史的9例。

抗体特异性主要为Ｒh 血型系统66例( 41.25%) ；MNS 血型系统34 例( 21.25%) ; Lewis 血型系统30 例( 18.75%)。另外联合抗体3例（1.87%）。自身抗体14例（8.75%），特异性待定12例（7.50%）。具体见表1

表1　　    160例阳性标本的不规则抗体特异性分布

讨论  正常情况下，患者血液中无不规则抗体的存在，但在母婴血型不合妊娠、输血及血液制品等因素刺激后易产生红细胞同种异型抗体。随着输血医学的发展，人们逐渐认识到血型不规则抗体对输血安全和输血疗效所产生的影响，其不仅干扰ＡＢＯ血型的鉴定，还可引起迟发性免疫溶血性输血反应，使血液输注无效，并有可能危及患者的生命安全，所以在输血前进行不规则抗体的筛查及抗体类别的鉴定尤为重要。

      通过对137 例不规则抗体特异性分布的调查发现，最易产生血型不规则抗体的为Ｒh 血型系统( 66例) ，其次为MNS 血型系统( 34 例)和Lewis 血型系统( 30 例) 。Ｒh 血型系统抗体在血型免疫抗体中占有较高的比例，是引起免疫性溶血性输血反应和新生儿溶血症最常见的不规则抗体。在Ｒh 系统中以抗-E 所占比例最高( 45 例) ，因为Ｒh( D) 阴性血型在中国人中所占比例约为0.3%－0.5%，Ｒh( E) 阴性者占50% 左右［1］，因此产生抗E 抗体的机率高于抗D 抗体; E 抗原又是Ｒh 血型系统中除D 抗原外抗原性最强的抗原，Ｒh( E) 阴性者因输入E 抗原阳性血液或妊娠接受E 抗原刺激后容易产生抗-E 抗体; 由于目前Ｒh( D) 已经成为输血前的常规检查项目，并且Ｒh( D) 血型配合性输血的普遍推广和应用，为Ｒh( D) 阴性患者输注了Ｒh( D) 阴性的血液，为Ｒh( D) 阴性的孕妇注射抗D 免疫球蛋白，减少了抗-D 抗体产生的机率。而E 抗原目前在临床上为非常规检测项目，多数患者输血前未进行E 抗原的检测，因此抗-E 抗体的产生机率较高。MNS 血型系统的抗体以抗M 抗体最为常见( 27例) ，抗-M 抗体为冷凝集素，是人体血清中常见的一种不规则抗体，多为天然产生，在37 ℃很少有活性，一般在体内不能引起溶血反应，但可影响交叉配血，引起交叉配血不合。如果患者处于低温麻醉状态下手术时应注意，因为此类抗体可激活补体，当患者的体温在冷抗体最适反应温度范围内（ 4 ℃ － 20 ℃) 时，可发生溶血反应［2］。Lewis 血型系统中以抗-Lea 抗体多见( 28 例，)，抗-Lea ，以IgM 为主，多数在37 ℃没有活性，很少引起新生儿溶血病和溶血性输血反应，而且受血者的Lewis 血型系统抗体可被供血者血液中存在的Lewis 血型系统抗原中和，所以Lewis 血型系统抗体所致溶血性输血反应在临床上很少见，但也曾有Lewis 血型血型系统抗体引起溶血性输血反应的报道［3］。

      近年研究结果表明，在同种抗体和自身抗体之间还存在1 种兼有两者特点的抗体，称之为类同种自身抗体，该类抗体既具有选择性的针对相应的红细胞上的血型抗原、类似于同种抗体的性质，又有针对自身红细胞血型抗原的自身抗体的性质，类自身抗体甚至可以有广泛的反应性，在与不同的谱细胞反应时显示相对的强度，尤其是与相应抗原阳性的谱细胞反应比相应抗原阴性的谱细胞反应更强［4］。类抗体的特异性针对Ｒh 系统的抗原比较常见。我院查出一例患者血清中存在类抗-Ce 自身抗体。患者是同种异体造血干细胞移植后发展成自身免疫性溶血性贫血［5］。

按免疫球蛋白的类别，常见的不规则抗体可被分为IgG抗体和IgM 抗体两类。常见的盐水抗体一般是IgM 性质，与相应的红细胞可在盐水介质中发生凝集反应，能被2-Me 等巯基试剂破坏，多数在37℃无活性。在实验室常规操作中，试管法37℃孵育及2-Me 处理，是鉴别IgM 类抗体的临床意义或排除其干扰的常用手段。目前常见的不规则抗体检测方法有许多种，我科主要采用试管盐水法、试管抗球蛋白法、凝聚胺法、微柱凝集法等。这些方法有不同优缺点，在抗体鉴定中合理地联合运用这些方法，能有效提高不规则抗体的检测能力。如果患者血清中同时存在自身抗体和同种抗体，则同种抗体有可能被自身抗体所掩盖，此时会面临严重的输血反应的风险。可以通过经典的试验方法自身吸收试验。我院通过利用2-Me、吸收试验鉴定出一例IgM的自身抗体合并抗E。联合抗体除了Rh系统的抗Ec（8例）,抗Ce（2例）外，还有两例不同血型系统的联合抗体抗E+抗S（1例）,抗E+抗Mur（1例）。由于各种检测方法对于不同血型系统、不同特异性的抗体，可能存在较大的差异性，所以我们认为，为了降低不规则抗体漏检的风险，同时减少室温盐水抗体对其它方法的干扰，可以通过增加检测方法的种类来提高不规则抗体的检出及鉴别能力。对于Ｒh 系统的常见抗体，各种检测方法之间无显著性差异; 但对于Kidd 血型系统的抗体，有报道认为微柱凝集法敏感度较高，凝聚胺法敏感度较低［6］。

      有12例不规则抗体未检测其特异性，特异性待定的情况下患者若急诊输血，考虑到Ｒｈ系统占阳性率近50％，建议筛选Ｒｈ同型、交叉配血相合的血液输注。在输血领域，针对血型不规则抗体的问题还很多，究竟怎样的抗体是没有临床意义的？怎样的抗体临床意义不大，在抢救时可以输注不配合的血液? 怎样的抗体即使在急救时也需要严格做配合型输注? 怎样准确发现和确认药物抗体?这些问题，都需要我们输血工作人员不断的研究、探讨和学习［7］。

1. 崔秀娟． 临床不规则抗体筛查在输血前的应用． 中国医药指南，2012; 10( 25) : 145 － 146

2.  蔡兴权，符小玲，夏兰，等． IgM、IgG 抗-E 及抗-M 引起配血不合1例． 中国热带医学，2008; 8( 10) : 1790．

3.  洪小珍，许先国，朱发明，等． 血清学和分子生物学鉴定Lewis 血型抗体引起的输血反应． 中国实验血液学杂志，2008; 16 ( 5) :1192 － 1195．

4.  Dwyre DM，Clapper A，Heintz M，et al． A red blood cell autoantibodywith mimicking anti-E specificity． Transfusion，2004，44( 9) :1287-1292．

5. 赵洁  造血干细胞移植后免疫介导的类抗体检出1例  中国输血杂志 2017 ；3 （ 30） ：309-311

6.  Liu JC，Wang Y，Liu FP，et al． The manual Polybrene test haslimited sensitivities for detectingthe Kidd blood group system．Scan JClin Lab Invest，2009，69( 7) : 797-800．

7. 向东，关于不规则抗体检测中国输血杂志 2016；11（29）：1219