探讨慢性血吸虫感染患者自发性抑制性T细胞功能和T细胞亚群的改变及其相互关系

许娟 湖北省荆州市第三人民医院  邮编 434000

摘要：目的：观察慢性血吸虫感染患者自发性抑制性T细胞功能和T细胞亚群的改变，并探讨两者间的相互关系。方法：收集我院2016年1月-2018年1月期间48例血吸虫感染患者的临床样本，获取患者的STs功能和CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+的检测结果，分析两者的相互关系。结果：与正常人相比，血吸虫病患者STs功能、CD8+数量显著升高，CD3+和CD4+数量以及CD4+/CD8+比值显著降低；与慢性血吸虫感染患者相比较，晚期血吸虫感染患者的STs功能、CD8+数量显著升高，而CD3+和CD4+数量以及CD4+/CD8+比值显著降低，差异均具有统计学意义（p＜0.05）。结论：血吸虫感染患者CD8+与自发性抑制性T细胞功能分别呈正相关而CD4+/CD8+与自发性抑制性T细胞功能呈负相关。

关键词：慢性血吸虫感染；自发性抑制性T细胞功能；T细胞亚群

To explore the changes of spontaneous suppressor T cell function and T cell subsets in patients with chronic schistosomiasis infection and their relationship

 Xu Juan Third People's Hospital of Jingzhou City, Hubei Province, China  434000

 Abstract : Objective To observe the changes of spontaneous suppressor T cell function and T cell subsets in patients with chronic schistosomiasis infection, and explore the relationship between them. Methods: The clinical samples of 48 patients with schistosomiasis infection from January 2016 to January 1818 were collected. The STs function and CD3+, CD4+, CD8+, CD4+/CD8+ test results were obtained and the relationship between them was analyzed. Results: Compared with normal people, the number of STs function and CD8+ was significantly increased in schistosomiasis patients, and the number of CD3+ and CD4+ and the ratio of CD4+/CD8+ were significantly lower. While comparing with patients with chronic schistosomiasis infection, the STs function and the number of CD8+ in patients with advanced schistosomiasis infection Significantly increased, while the number of CD3+ and CD4+ and the ratio of CD4+/CD8+ were significantly lower, the difference was statistically significant (p<0.05). Conclusion: CD8+ is positively correlated with spontaneous suppressor T cell function in patients with schistosomiasis infection, and CD4+/CD8+ is negatively correlated with spontaneous suppressor T cell function.

Key words: chronic schistosomiasis infection; spontaneous suppressor T cell function; T cell subset

    血吸虫病是感染科常见的一种疾病，是由裂体吸虫属血吸虫引起的一种慢性寄生虫病，对人体的危害极大^[1]。因此，早期预防感染和后期控制疾病传染非常重要。近年来，有研究提出，自发性抑制性T细胞功能（STs功能）和T细胞亚群的改变与血吸虫病的免疫调控有密切的联系^[2-3]。本次研究以2016年1月-2018年1月期间收治的48例血吸虫感染患者为例，探讨慢性血吸虫感染患者自发性抑制性T细胞功能和T细胞亚群的改变及其相互关系。

    1 资料与方法

    1.1一般资料

    收集我院2016年1月-2018年1月期间的48例血吸虫感染患者的外周血，其中慢性血吸虫病27例，男15例、女12例，年龄在18~65岁，平均（41.35±12.45）岁；晚期血吸虫病21例，其中男14例、女7例，年龄在20~65岁，平均（40.27±10.34）岁，其中ELISA方法检测所有患者HBsAg和IgM抗HBc均为阴性。所有患者的临床信息完整且患者以及家属知情同意，所有研究均得到本院的伦理委员会的批准。1.2方法

1.2.1 STs功能检测方法

    采集患者外周静脉血10ml，置入肝素抗凝管后行常规分离外周血单个核细胞，洗涤后用RPMI 1640培养液将其调至10⁹/L，经细胞悬液分为2份，一份为反应细胞，一份加入50μg/ml丝裂霉素并置于37℃水中30min，通过三次洗涤后将浓度调至10⁹/L，由此得到STs^[2]。将得到的STs细胞加入linbro 96孔平底培养板中，其中实验孔50μl STs加入100μl反应细胞，对照孔加入150μl反应细胞，终浓度均为5μg/ml的Con A^[3]。最后，置入37℃5%CO₂条件下进行培养，并在48h后再加入3H-TdR 1μci/孔，72h后用多头细胞收集器将收集到的细胞置入49型玻璃纤维滤纸上，烘干后再置入10ml闪烁液中，测量其抑制活性。

1.2.2 T细胞亚群的检测

   抽取患者外周静脉血5ml，采用FACS Calibur BD流式细胞仪，以免疫速率散射比浊法检测CD3+、CD4+、CD8+等指标。

    1.3 统计学

    统计学处理所有实验数据均经SPSS 20. 0统计软件分析。计量资料以±s表示，采用t 检验或方差分析，进一步两两比较采用LSD-t检验。p＜0.05为差异有统计学意义。

    2 结果

    与正常人比较，血吸虫病患者STs功能、CD8+显著升高，CD3+、CD4+、CD4+/CD8+显著降低；与慢性患者比较，晚期患者STs功能、CD8+显著升高，CD3+、CD4+、CD4+/CD8+显著降低，差异均具有有统计学意义（p＜0.05），详见表1。

表1 三组患者STs功能及T细胞亚群检测结果比较±s

    3 讨论

    宿主感染血吸虫后，血吸虫为抵抗宿主存活下来就会产生血吸虫的免疫逃避机制，这其中涉及抗原改变和免疫调节机制^[4-6]。抗原改变指血吸虫抗原的变异、模拟和伪装，免疫调节是血吸虫通过合成神经分子、蛋白酶、细胞因子等来抑制宿主的免疫细胞功能，从而得以存活^[7]。此外，血吸虫病的发展和严重程度与宿主自身免疫调节有密切的关系。已有研究者指出，血吸虫感染宿主后会导致宿主的细胞免疫功能降低，而宿主的自发性抑制性T细胞功能、T细胞亚群变化在血吸虫的免疫调控中发挥着重要的作用，因而我们可以通过检测STs功能和T细胞亚群的变化判断血吸虫病的感染程度^[8-10]。

    本次研究结果显示，与正常人比较，血吸虫病患者STs功能、CD8+显著升高，CD3+、CD4+、CD4+/CD8+显著降低；而与慢性患者比较，晚期患者STs功能、CD8+显著升高，CD3+、CD4+、CD4+/CD8+显著降低以上结果表明血吸虫感染患者CD8+和CD4+/CD8+与自发性抑制性T细胞功能呈正相关和负相关^[11]。感染血吸虫后，血吸虫虫卵周围的辅助性T细胞通过释放IL-2、趋化因子及移动抑制因子等促进多种炎症因子局部聚集，介导肉芽肿的形成。但在慢性感染阶段，肉芽肿内的TS功能更强，通过释放可溶性抑制因子抑制其他T细胞亚群^[12-13]。因此，可见STs功能明显升高，CD4+/CD8+比值明显降低而CD8+数量显著升高说明患者对血吸虫感染的抵抗力降低。上述结果显示晚期患者各项指标变化更明显，这主要是由于STs功能升高更显著，血吸虫患者Ts活性随着病程的进展显著升高，根据其与T细胞亚群变化呈负相关的关系得出，晚期患者细胞免疫更低^[14-15]。

    综上所述，血吸虫病的发展与免疫调节有密切的关系，血吸虫感染患者CD8+与自发性抑制性T细胞功能分别呈正相关而CD4+/CD8+与自发性抑制性T细胞功能呈负相关。

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