人胃腺癌组织中S100A6的表达与化学多药耐药影响及预后的相关性研究

邵润东¹,孙纲^2△，刘子源³，卢光辉¹

( 1.锦州医科大学中国人民解放军联勤保障部队第967医院规培基地， 辽宁大连，116021,2.中国人民解放军联勤保障部队第967医院，辽宁大连 ，116021，3大连医科大学中国人民解放军联勤保障部队第967医院规培基地，辽宁大连，116021)

大连市自然科学基金：1712060

【摘要】目的 探讨人胃腺癌组织中S100A6的表达规律与已知多药耐药因素P170和GST-π的表达规律、患者的临床病理情况以及经过相同化学治疗后患者预后生存期之间的相关性。方法 应用免疫组化方法对随机选取的大连医科大学附属第一医院2008年至2013年胃癌根治术后，病理为胃腺癌，经相同方案化学治疗且随诊资料完整的患者74例病理标本进行检测，进一步收集胃腺癌组织中S100A6表达规律，将资料进行总结并应用SPSS软件进行统计学计算分析。结果 入选人胃腺癌病例中S100A6总阳性表达率为86.5%，但与患者年龄、性别、肿瘤组织学分级、肿瘤临床分期、CA19-9情况之间无统计学意义（P>0.05）；S100A6阳性表达率与P170阳性表达率之间存在成正相关性（P<0.05）， S100A6阳性表达率与GST-π阳性表达率之间无相关性,（P>0.05）； S100A6阳性表达情况与患者相同化学治疗后预后生存期之间存在负相关性（P<0.05）。结论S100A6在人胃腺癌组织普遍存在；S100A6阳性表达率与胃腺癌患者临床、病理情况及肿瘤标志物CA19-9无相关性；S100A6阳性低表达可能是胃腺癌多药耐药的不利因素、化学治疗预后生存期的有利因素。

【关键词】S100A6;多药耐药;人胃腺癌

胃癌是我国发病率及死亡率很高的消化道恶性肿瘤，但治疗效果及预后仍处于不佳水平，临床中以病理类型为腺癌的胃癌较为多见^[1]。相对于国内已普遍推行的胃癌规范化手术，术后化学治疗的效果可能影响了患者的预后及生存期，而肿瘤对化疗药物的多药耐药特性 (multi-drug resistance ，MDR)可能为一个决定性因素。MDR是肿瘤细胞对抗化学治疗的防御措施，当其反复接触一种化疗药物后，可自发产生耐药效应，并继发对其它结构及功能不同的化疗药物产生交叉耐药，从而直接导致了化疗效果的失败^[2]。MDR的机制、MDR与胃癌的关系、以及如何抵抗并屏蔽MDR也成为改善胃癌预后研究的热点领域。涉及基因、蛋白、通道、酶等多方面、多角度^[3]，如已知的MDR有利因素：P170、GST-π等^[4]。

S100A6是S100蛋白家族的一员，在细胞中广泛离散分布，与钙离子浓度及靶向目标相互螯合并发挥生物效应^[5]。其在肿瘤中异常表达，与多种肿瘤的发生、发展关系密切。直接干预肿瘤的产生、进展、转移以及预后^[6、7]。而其在胃癌中的表达规律以及与MDR的关系有待进一步扩展研究。

综上，本研究深入探讨了人胃腺癌组织中S100A6的表达情况、P170和GST-π的表达情况，结合患者的临床情况、病理情况、肿瘤标志物情况、相同方案化疗后的预后生存期之间的联系及规律。为研究及抑制MDR的机制提供新思路。

1材料及方法。

1.1研究对象

随机选取大连医科大学附属第一医院2008年至2013年胃癌根治术后患者，其手术前病理类型为腺癌，术中、术后证实处于T_XN_XM₀状态,手术过程顺利，诊治及随诊资料完整，手术后均按以奥沙利铂、亚叶酸钙、5-Fu为中心的联合方案行化学治疗4-6疗程。

1.2研究方法及判定标准

将入选病例病理石蜡标本切片处理后，采用MaxVision/HRP 免疫组化染色并进行检测。主要试剂为：鼠抗人S100A6单克隆抗体（10245-1-AP）、鼠抗人P170单克隆抗体（JSB-1）、鼠抗人GST-π单克隆抗体(LW29)。已知阳性平片作对照。

S100A6主要表达于细胞质及细胞核、P170主要表达于细胞膜和细胞质，GST-π主要表达于细胞质，以上染色成棕黄色颗粒状判定为阳性。其中，阳性细胞比例大于75%判定为（+++）；位于25%及75%之间判定为（++）；位于5%及25%之间判定为（+）；小于5%判定为（-）^[8]。

CA19-9判定标准结合临床实验室区间，以大于27U/mL记作（+）。

1.3数据整理及统计

收集各病例S100A6、P170、GST-π的表达情况，根据判定标准阳性程度进行统计；收集各病例年龄、性别、肿瘤组织学分级及临床分期情况；收集各病例手术前肿瘤标志物CA19-9情况；收集化学治疗后患者生存期（中位生存时间）情况。

采用SPSS17.0统计软件进行数据分析,依次采用秩和检验（Mann-Whitney）法、Log-Rank法、Spearman等级相关分析法进行研究,检验水准α设定为0.05，P<0.05表示具有统计学意义。

2研究结果

2.1一般情况

共入选74例病例，其中男性患者46例，女性患者28例；入选病例中年龄区间为36-85岁，平均年龄为55岁，中位年龄为65岁。其中60以上患者34例，50-60岁患者28例，50岁以下患者12例。定期随访。

2.2S100A6的阳性表达情况以及与患者临床、病理情况之间的关系。

组内S100A6总阳性表达率为86.5%(64/74)，经秩和检验可得出S100A6阳性率的分布与患者年龄、性别、肿瘤组织学分级、肿瘤临床分期、CA19-9阳性情况均无统计学相关性，（P>0.05）（表1）。

表1人胃癌中S100A6表达情况与一般及病理情况的相关性分析

2.3S100A6阳性表达情况与已知多药耐药因子P170和GST-π阳性表达情况之间的关系。

组中P170总阳性表达率为86.5%（64/74），其中15例为（+++），26例为（++），23例为（+），10例为（-）； GST-π阳性表达率74.3%（55/74），其中28例为（+++），13例为（++），14例为（+），19例为（-）。

采用Spearman法分别对S100A6与P170、GST-π阳性表达之间进行统计学分析得出：S100A6阳性表达率与P170阳性表达率之间存在正相关性（r=0.243， P=0.004）；S100A6阳性表达率与GST-π阳性表达率之间无相关性（P>0.05）。

鉴于P170为已知的影响多药耐药有利因素，本组S100A6阳性低表达可能是肿瘤化学治疗药物多药耐药的不利因素。

2.4S100A6阳性表达情况与相同化学治疗后预后生存期之间的关系。

经Log-Rank单因素相关性分析,S100A6与患者化学治疗后预后生存期有关（P<0.05），且S100A6阳性表达情况越低，患者相同化学治疗后预后生存期越长，S100A6低表达可能是对肿瘤化学治疗预后生存期的有利因素（表2）。

表2人胃癌中S100A6表达情况与经相同化学治疗后生存期单因素相关性分析

3讨论

以病理分型为腺癌为代表的胃癌在我国的发病率居高不下，且近年发病率有逐步上扬趋势^[9]。因其早期缺乏典型的临床特异性症状，易于被