不同浓度理脾复方制剂对幼龄厌食大鼠胃肠动力的影响

   谢莹¹，彭玉²，詹伟¹，张嫱¹，刘启艳¹

（1 贵阳中医学院，贵州 贵阳 550002；

2 贵阳中医学院第二附属医院，贵州 贵阳 550001）

摘要：目的:探究不同浓度理脾复方制剂颗粒剂对厌食大鼠的作用靶点，了解其对胃肠动力的影响，为理脾复方制剂颗粒剂的临床运用提供实验依据。方法：将72只大鼠适应性喂养3天后，按雌雄各半随机分为空白组（简称A组）、模型组（简称B组），A组正常饲料喂养，B组特制饲料喂养14天。造模成功后B组按雌性各半随机分生理盐水组（简称C组）、理脾复方制剂低剂量组（简称D组）、理脾复方制剂中剂量组（简称E组）、理脾复方制剂高剂量组（简称F组），共6组，每组大鼠12只，观察摄食量、体质量、精神等。D、E、F组分别用理脾复方制剂低、中、高剂量干预， C组用生理盐水干预，B组为模型对照组。7天后取材，并用碳末灌胃法测量胃排空率及小肠推进率。结果：治疗前：B组与A组比较P<0.05，有差异性，显示厌食大鼠在摄食量、体质量、胃排空与小肠推进率方面均低于正常大鼠。治疗后：D、E、F组在增强胃排空、小肠推进率上优于B、C组，依次为E>F>D，以中剂量组为佳。摄食量、体质量上与A组比较，以E组效果最佳。结论：理脾复方制剂治疗厌食均有效，其机制可能是通过促进胃排空、小肠推进率，增强胃肠动力而恢复食量，治愈厌食。不同浓度中以中剂量效果最好，该剂量是临床用于治疗厌食常用剂量，为临床治疗厌食提供了实验依据。

 关键词：理脾复方制剂、厌食大鼠、胃肠动力

  小儿厌食症是指外消化道和全身性器质性病变，表现为较长时间的食欲减少或消失，食量减少甚至拒食，是小儿常见症^[1]。据报道婴儿和学龄前儿童厌恶进食问题的发生率约为 12%-34%，以 l-6 岁儿童多见，约占儿童疾病的 40％以上，城市发病率高于农村，独生子女的发病率更高^[2]。小儿厌食首先是一种摄食行为异常的表现，若长期得不到改善，可致患儿营养不良，影响生长发育，并可造成免疫力下降，从而使其他疾病的易感性增加^[3]。小儿对食物的摄入、消化、吸收需靠胃肠动力实现，若胃对食物的排空、蠕动不足，小肠对食物的推进力不足均可影响食物的吸收、排泄，进而影响食物摄入，发生厌食。正如《内经·经脉别论》曰:“饮入于胃,游溢精气,上输于脾,脾气散精,上归于肺,通调水道,下输膀胱。水精四和,五经并行”，可见厌食的发生与胃肠动力不足相关。文献报道^[4][5]，通过中药小儿消食颗粒、健脾消食I号治疗，可提高胃肠动力和胃排空。文献检索显示^[6][7]，检测胃肠动力常用碳末灌胃法。本文使用的理脾复方制剂是笔者所在单位名老中医经验方“运脾散”的院内颗粒剂，临床疗效好，为探索其对厌食大鼠胃肠推进的影响开展相关实验，现总结如下：

材料与方法

1.1材料

1.1.1实验动物  健康SD幼龄（40-45d龄）大鼠SPF级72只（雌雄各半），质量（65±10）g，由贵阳中医学院动物实验中心提供[许可证号：SCXK(湘)2014-0011]。

1.1.2药物与制备  理脾复方制剂（苍术、白术、茯苓、薏苡仁各10g，山药、陈皮、枳壳、神曲、甘草各6g）参照陈大业^[8][9]运脾颗粒提取、收缩和干燥工艺研究由贵阳中医学院药学院制备而成。上述剂量为临床3岁儿童用量，本实验将该剂量设置为中剂量组，为了解不同药物剂量及浓度对胃肠动力的差异性，本实验将高于该剂量1倍的设为高剂量组，低于1/2倍为低剂量组。因此将高剂量组设为中剂量的1倍，低剂量组为中剂量的1/2倍。按照人和鼠给药剂量换算公式^[10]进行计算：理脾复方制剂低剂量2.39g/kg，每克含原生药0.16g；理脾复方制剂中剂量4.78g/kg，每克含原生药0.32g；理脾复方制剂高剂量9.55g/kg，每克含原生药0.64g。

1.1.3实验试剂  羧甲基纤维素钠，北京索莱宝科技有限公司，批号：20200704；参考文献制备好营养性半固体糊^[11]：取 16g 羧甲基纤维素钠，溶于400ml蒸馏水中，分别加入25.6g奶粉、12.8g 糖、12.8g 淀粉和10%活性炭末50.7g，搅拌均匀。配制300ml约300g的碳末半固体糊状物。4℃冰箱冷藏，使用2h前恢复至室温。

1.2方法

1.2.1造模方法  正常组给予常规饲料（贵阳中医学院实验动物中心提供），模型组采用汪受传^[12]病因模拟法，运用特制饲料对造模组大鼠进行喂养。适应性喂养3天后，于每天上午9时给大鼠投食及提供饮水, 连续 14 d,并记录每只大鼠的摄食量、毛发、体质量、情绪。造模14 d后摄食量低于空白组20% -30%，平均体质量低于空白组10%-15%以内，表明造模成功^[12]。

1.2.2分组与给药  所有大鼠分笼饲养，自由进食饮水，适应性喂养3天后，将大鼠雌性各半随机分为A组、B组，A组正常饲料喂养，B组特制饲料饲养14天建立厌食大鼠模型，造模成功后B组按雌性各半随机分C、D、E、F组，共6组，每组12只，药物干预给药：（1）B组为模型对照组不予给药；（2）C组生理盐水0.01ml/g；（3）D组理脾复方制剂低剂量0.02ml/g；（4）E组理脾复方制剂中剂量0.04ml/g；（5）F组理脾复方制剂高剂量0.1ml/g，连续药物干预7d，每日1次。

1.2.3 胃排空率：末次灌胃后，禁食不禁水24h，采用碳末灌胃法测量；灌胃器抽取半固体糊，称重（记为半固体糊重量）。对大鼠灌胃，30min 后，沿腹中线剖开大鼠腹腔，找出胃，用细线结扎胃贲门和幽门，防止胃内容物流出，取出胃并用滤纸吸干表面水分后，称重（记为胃全重），将胃剪开，用生理盐水反复冲洗干净，洗去胃内容物，再用滤纸吸干胃表面水分，称重（记为胃净重）。胃排空率＝[1-（胃全重-胃净重）/半固体糊重量] ×100%，以此数值衡量胃排空率。

1.2.4小肠推进率：取胃后迅速分离肠系膜，取出小肠，直铺于白纸上，量取自幽门括约肌至炭糊到达处为活性炭推进距离L2，量取自幽门括约肌至回肠末端的距离为小肠全长L1，按下述公式计算肠推进率，小肠推进率（%）＝L2/L1×100 %。

1.2.5统计学处理  实验结果采用SPSS 23.0统计软件进行统计处理，用均数±标准差（`x±s）表示，多组间比较釆用单因素方差分析，以P<0.05为有统计学意义。

2.结果

2.1造模后、药物干预后各组试验大鼠摄食量、体质量观察   实验第1d，B组平均摄食量、体质量与A组比较无明显差异（P>0.05）；第3d起，B组平均摄食量、体质量较A组均逐渐降低（P<0.05），有差异性，显示造模成功。如表2，造模7天与造模14天比较，B组摄食量降低不明显（P>0.05），体质量增长缓慢（P<0.05），结果显示这可能与长期摄入减少致体质量增长缓慢有关，二者造模天数的选择对建立厌食模型无明显差异。

表1   造模后各组实验大鼠摄食量、体重变化（`x±s，g）

与A组相比：B组平均摄食量、体质量均P<0.05；

7天与14天相比：B组摄食量P>0.05；体质量P<0.05。

表2   造模后各组实验大鼠摄食量、体质量变化图

2.2药物干预后模型大鼠摄食量、体质量观察   药后干预的摄食量、体质量与A组比较，以E组效果最佳（P>0.05），结果显示与A组无明显差异，说明药物治疗中剂量组均能促进厌食大鼠摄食量及体质量；B组未予药物干预，但摄食量、体质量与A组无明显差异（P>0.05），说明未予药物干预的厌食大鼠经过喂养正常饲料后其摄食量、体质量也能自行增长（见表3）。

                   表3  药物干预后各组实验大鼠摄食量、体质量

与A组比较：摄食量B、C、F组均P<0.05，D、E组均P>0.05；

体质量B、E组均P>0.05，C、D、F组均P<0.05。

2.3理脾复方制剂对实验大鼠胃肠动力的影响  

2.3.1治疗前实验大鼠胃排空率、小肠推进率  B组胃排空率、小肠推进率较A组均有降低（P<0.05），有差异性，具有统计学意义；说明造模后的厌食大鼠存在胃排空率下降，小肠推进率减慢。

表3  治疗前各组实验大鼠胃排空率、小肠推进率的影响（`x±s，%）

与A组比较：#P<0.05，##P<0.05。

2.3.2治疗后模型大鼠胃排空率、小肠推进率   与B组比较，D、E、F组胃排空率、小肠推进率均提高（P<0.05），C组治疗效果无明显差异（P>0.05），其中不同浓度理脾复方制剂对胃排空率、小肠推进率的影响依次为：E > F> D，E组治疗效果最为显著（见表4、5）。

表4  治疗后各组模型大鼠胃排空率、小肠推进率（`x±s，%）

 与B组比较：D、E、F组均P<0.05，C组 P>0.05。

           表5   治疗后各组模型大鼠胃排空率、小肠推进率变化的柱状图

3.讨论

小儿厌食症是指外消化道和全身性器质性病变，表现为较长时间的食欲减少或消失，食量减少甚至拒食，是小儿常见症^[1]，越来越多的研究认识到大多数儿童厌食可能并不是由于疾病引起，而是由于随着独生子女增多，父母溺爱、喂养方法不科学、不良的饮食习惯、不合理的饮食制度等造成^[13]。因小儿脏腑娇嫩，五脏六腑皆不足，以“脾常不足”为显著，饮食失调、喂养不适易损伤脾胃，胃失受纳腐熟，脾失健运无以输布水谷精微^[14]，长期可致营养不良，增加其他疾病的易感性。

3.1胃肠动力与厌食的关系  胃排空的动力是胃的收缩运动,胃排空的生理学基础为胃、十二指肠的协调运动:胃窦收缩加强而十二指肠收缩减弱时,排空加快；反之,胃窦运动功能减弱,十二指肠活动增强,胃排空就减弱^[15]。胃肠动力不足则其收缩的力度及频率不足以引起食物的消化吸收障碍，进而影响进食。葛小平等^[16]认为厌食症患儿胃电节律异常率较正常对照组明显增高,脾胃气虚型以胃动过缓最为突出,而肝胃不和型以胃动过速较为明显,脾胃不和型、脾胃阴虚型则以胃节律紊乱为主。蒋莹等^[17]对胃液体排空测定和胃动力学指标测定，复查结果显示胃半排空时间、胃窦收缩频率、胃窦运动指数较治疗前均有明显的改善，说明厌食患儿的确存在胃运动功能障碍。肖满田等^[18]用胃电图检测，厌食组胃电异常，胃电基本节律减慢，提示厌食儿童胃运动功能异常，胃排空过缓。本研究结果证实，造模后B组胃排空率、小肠推进率较A组降低（P<0.05），表明厌食大鼠可能存在胃排空率减慢、小肠推进率降低；且造模后摄食量、体质量均降低也可能与胃排空、小肠推进率的减慢有相关联系。

3.2理脾复方制剂均能促进胃肠动力  导师彭玉教授为全国第六批老中医药专家学术思想继承学习指导教师，师承国家级名老中医黄建业教授，导师凝结黄老治疗小儿厌食症经验方“运脾散”，2013年研发为“理脾复方制剂”院内制剂，并获国家发明专利，是笔者所在单位广泛应用于治疗小儿厌食的有效方。导师近20年开展相关临床研究显示：68例以运脾散治疗厌食患儿，其食量增加、体重上升最为突出，总有效率为95.6%^[19]；90例厌食患儿中，以硫酸锌作为对照组，总有效率73.3%，运脾散组93.3%^[20]。上述研究证实本方临床治疗小儿厌食疗效好。本实验研究结果显示：理脾复方制剂低、中、高剂量组均能提高厌食大鼠胃排空率、小肠推进率，以中剂量组治疗效果最显著，这可能是其能促进胃肠动力的机制之一。并且中剂量为儿童3岁临床常用量，与临床治疗小儿厌食疗效好相吻合，故该方值得推广。

3.3理脾复方制剂促进胃肠动力的药理作用

   导师实验研究表明，“运脾散治疗小儿厌食症可能是通过调节中枢和外周血中的CCK-8 分泌作用, 影响食欲中枢功能, 发出正常的摄食指令, 增强摄食行为, 达到增进食欲、防治小儿厌食症的目的^[21]”。本次研究过程中，理脾复方制剂能促进厌食大鼠胃肠动力，其君药为苍术。相关文献显示苍术是黄建业治疗厌食用药频次最高的药物^[22]。苍术属菊科植物，性温，味甘、苦，归肝、脾、肾三经。主要功能是燥湿健脾，临床常用于食欲不振、腹胀和腹泻等消化系统病证^[23]。临床研究^［24-26］发现苍术具有很好的调理胃肠功能、促进胃肠动力、防治胃肠慢性炎症及溃疡性胃肠疾病的作用。目前临床应用较多的是麸炒苍术。刘芬等^[27]实验结果表明，苍术提取物苍术素、β-桉叶油醇和茅术醇等成分可从胃肠道-神经肌肉调控系统来调节胃肠功能，明显改善胃肠动力障碍。

白术“通过影响胃肠道Ache、SP阳性神经的分布促进胃肠道运动，还能促进肠道菌群中的有益菌双歧杆菌和乳杆菌的增殖、改善肠道内菌群状况的功能”^[28-30]。茯苓能抑制正常小鼠胃排空率和小肠推进率，延长胃肠道与食物接触的时间，促进吸收，但不会导致胃肠蠕动过慢，影响食物的排泄^[31]。综上所述，理脾复方制剂中以苍术为君药，既能健脾助运，又能燥 湿，配以白术、茯苓、山药、薏苡仁、神曲、枳壳，全方中有补中寓消、消中寓补、补而不滞的调和作用。

4. 结论  

通过实验证实，不同浓度理脾复方制剂能提高厌食大鼠胃排空率、小肠推进率，这可能是其能通过促进胃肠动力的作用治愈厌食的。其中中剂量与临床用量吻合，为临床应用中剂量提供实验理论支撑。

参考文献：

[1]江载芳,申昆玲, 沈颖.诸福棠实用儿科学[M].8版.北京.人民卫生出版社,2015 . 

[2]吕明芳,李军.近 5 年来推拿针刺治疗小儿厌食研究概况[J].按摩与康复医学(中旬刊),2011,2(6):66-68.

[3]张健林.小儿厌食症的研究和中西医治疗[J].医学综述, 2010,16(8):1198-1201．

[4]孔海钢.小儿消食颗粒对小儿厌食症患者胃肠动力及胃泌素分泌的影响[J].新中医,2016,7,48(7):193.

[5]潘程程,李岩.健脾消食1号对脾虚大鼠胃排空及胃肠激素的影响[J].实用药物与临床,2015,18(6):642-644.

[6]黎银波,胡宇飞,姚金成.四磨汤不同提取部位对小鼠胃肠运动的影响[J].中国药业,2016,8,25(15):27-29.

[7]周洲,凌江红,徐宽,等.柴胡疏肝散对功能性消化不良大鼠胃排空的促进作用及机制[J].山东医药,2017,57(37):5-8.

[8]陈大业,刘文.运脾颗粒提取、浓缩和干燥工艺研究[J].贵阳中医学院学报,2016,11,6 (38):16-17.

[9]陈大业,刘文.运脾颗粒成型工艺、临界相对湿度和质量标准提取工艺的考查[J].贵阳中医学院学报,2017,1,1(39):32-22.

[10]迟鹏,李岩,陈苏宁,等.消食和胃冲剂对小鼠胃肠动力的影响[J]．世界华人消化杂志,2010,18(23): 2464-2468．

[11]王继芳.小儿开胃增食合剂对厌食症模型大鼠胃肠动力及胃动素水平的影响[D].甘肃:甘肃中医药大学,2016.

[12]汪受传,张月萍,陶勇等.特制饲料喂养幼龄大鼠建立小儿厌食症模型.南京中医药大学学报.1999,15(13):149-150.

[13]龚燕霞,徐济达,莫宝庆,等.南通市3-13岁儿童厌食高危人群分析[J].中国校医,2005,19(5):452-454.

[14]汪受传.中医儿科学[M].2版.北京:人民卫生出版社,2011.

[15]任平,黄熙,张莉,等.四君子汤对实验性脾虚大鼠胃排空率的影响[J].中国中西医结合杂志,2000,8,20(8):596-598.

[16]葛小平,陈华,盛丽先.厌食症患儿胃肠激素及胃电图变化的临床意义[J].JTCM,2001,1,1（26）：40.

[17]蒋莹,张寅.超声对小儿厌食治疗前后胃动力学改变的探讨[J].中国超声诊断杂志,2003,4(4):28.

[18]肖满田,叶轶坤,钱兴国.儿童厌食症胃电图临床研究[J].中国儿童保健杂志,2008,16(6):644-646.

[19]彭玉.黄建业教授治疗小儿厌食症经验[J].贵阳中医学院学报,1998,20(2):6-7.

[20]彭玉,邢风玲,冷丽,等.运脾散干预脾运失健小儿厌食症的疗效评价[J].时珍国医医药,2015,26(5):1162-1164.

[21]彭玉,吴高鑫.运脾散对厌食大鼠下丘脑和血浆CCK-8的调节作用[J].中医儿科杂志,2007,3,3(2):20-21.

[22]杜莎莎,彭玉,等.基于数据挖掘黄建业及其运脾散治疗厌食用药规律分析[J].中国中医基础医学杂志,2018,24(04):553-555.

[23]付梅红,朱东海,方婧,等.苍术的化学、分子生药学和药理学研究进展[J]．中国中药杂志,2009,34( 20) :2669-2672．

[24]刘庆林.苍术药对的临床应用[J].湖南中医杂志,2002,18( 5):45-46．

[25]袁宪梅.苍术的临床应用[J].中国民间疗法,2008( 8):55．

[26]张亚杰.平胃散及其组方药材对大鼠胃排空影响的实验研究[J].中国中医基础医学杂志,2014,20( 9):1214．

[27]刘芬,刘艳菊,田春漫.苍术提取物调节脾虚证大鼠胃肠动力障碍的作用机制研究[J].北京中医药大学学报,2014,12,12(37):825-829.

[28]朱金照,张捷,许其增,等.白术促进大鼠胃肠运动的进制探讨[J].中国临床药学杂志,2001,10(6):365-68．

[29]朱金照,冷恩仁,张捷,等.白术对大鼠肠道乙酰胆碱酶及P物质分布的影响[J].中国现代应用药学杂志,2003,20(1):14-16．

[30]鄢伟伦,王帅帅,任霞.白术对小鼠肠道菌群调节作用的实验研究[J]．山东中医杂志,2011,30(6):417-419．

[31]冉小库,孙云超,刘霞,等.茯苓对正常小鼠胃肠功能的影响[J].中国现代中药,2015,17(7):686-689.