紫草的质量标准研究进展

于 典*，何 婷，巩 颖，杨维，华国栋^#（北京中医药大学 东方医院 药学部，北京 100078）

摘要：目的：本文综述了目前紫草质量标准的研究现状，着重比较近年来研究紫草所应用的指标成分和研究方法的异同，并进行归纳总结。方法：本研究主要通过收集中国知网近15年来关于紫草质量标准的研究进展，以“紫草、质量标准、研究方法”为关键词，按照药典方法、基原考证、成分研究法以及其他方法这四大类，对紫草质量标准现状进行分类、归纳。并对15年来紫草质量标准研究报道中的指标成分、研究方法、数据结果、指控效果进行评价。结果：检索总文献132篇， 有效文献数24篇，与方法内容对应的结果可见:近年来市场紫草的质量参差不齐，不同产区紫草的含量差异很大。就目前紫草的质量标准来说，建议在考察不同产地紫草的含量标准时，增加更多成分为辅助指标，建立市场紫草综合评价体系。结论：本文对紫草指标成分和方法应用进行总结，具有一定导向作用，对未来紫草质量标准的建立提供一定参考。

关键词：紫草；质量标准；研究方法；综合评价体系

Progress in quality standards of lithospermum

Yu dian *, he ting 2, gong ying 3，yang wei 4,  hua guodong^# Oriental hospital of Beijing university of Chinese medicine (Beijing 100071)

Abstract: this paper summarizes the present research status of the quality standard of yew, and mainly compares the differences and similarities of the index components and research methods used in recent years, and summarizes them. This study mainly collected the research progress on the quality standard of purple grass in the past 15 years, and classified and summarized according to the four categories of Pharmacopoeia method, basal research method, component research method and other methods. The index composition, research method, data result and accusation effect in the research report of quality standard of purple grass in the past 15 years were evaluated. According to the results, in recent years, the quality of purple grass in the market is uneven, and the content of purple grass in different production areas varies greatly. As for the current quality standards of purple grass, it is proposed to increase more components as auxiliary indicators and establish a comprehensive evaluation system for the market. In this paper, we summarize the components and methods of purple grass index, and provide some reference for the establishment of quality standards of purple grass in the future.
Key words: purple grass; Quality standards; Research methodology; Integrated evaluation system

①收稿日期：2018年9月23日

*通讯作者：华国栋,67689957

1 前言

紫草的质量标准既有国家药典，也有地方标准和企业标准。《中华人民共和国药典》2015版，收载药用紫草来源为紫草科植物新疆紫草(Arnebia euchroma(Royle)Johnst)或内蒙紫草(ArnebiaguttataBung)的干燥根。随着全球化经济的发展,中国提高医药产品的质量控制水平已是必然需求。本文通过对近年来学者们对紫草的化学成分和质量控制方法进行总结,为紫草的质量控制方法的选择提供借鉴，有利于监察市场紫草饮片全过程的质量控制，保障临床疗效。     

同时，对不断更新方法、制定统一的市场药用紫草评价体系，起一定借鉴作用。本文就近几年紫草质量标准的相关研究方法综述如下。

2 紫草质量标准的研究方法

随着紫草制剂越来越广泛的应用于临床，如何更科学、合理制定紫草的质量标准,既可以保障并提高国内紫草制剂的疗效,又可以参与国际市场竞争,加速国内紫草产品进入国际市场,成为目前值得认真考虑的问题。段乃超^[1]在鼻腔手术中，应用复方紫草膏油纱条代替凡士林纱条进行鼻腔填塞,取得了良好止血效果。杨东方^[2]对热带假丝酵母与黑曲霉菌应用不同配比的紫草复合制剂，结果证实均有一定的抑制作用。张国娣^[3]对60例Ⅱ期压疮患者贴敷紫草制剂，结果显示其能够更快促进Ⅱ期压疮愈合。可见，越来越多的学者在关注紫草的药效应用。

2.1药典鉴别

药典鉴别方法通常包括性状鉴别、显微鉴别和理化鉴别。理化鉴别目前最常用的是显色反应、光谱法和色谱法。紫草的药典法鉴别主要采用薄层色谱法、紫外分光光度法和高效液相色谱法。

张道英等^[4] 比较13个不同批次紫草的羟基萘醌含量，并比较在冷浸法和温浸法提取条件下，萘醌含量对提取效果的影响。研究发现很大一部分紫草的质量并不过关，不同地区紫草的羟基萘醌含量差异较大。陈征^[5]以阿卡宁为指标，对10个市场的紫草进行检测，采用冷浸法测定不同市场紫草浸出物的含量。结果显示，10个不同市场紫草的阿卡宁和浸出物含量差异明显，且只有两个市场紫草的阿卡宁含量符合《药典》标准。胡国冰等^[6]对来源于不同医疗机构的7个紫草样品，应用薄层色谱法、紫外分光光度法联合高效液相色谱法进行含量测定。结果显示，有6个样品的阿卡宁成分含量高于10版《中国药典》的最低限量。这表明，不同医疗机构紫草饮片的含量差异很大。程敏等^[7]采用高效液相色谱法测定紫草中阿卡宁的含量,并对紫草质量建立评价方法。结果显示，不同市售紫草样品的阿卡宁含量成分存在一定差异。而本方法安全、稳定、准确，可用于综合评价市售紫草的质量。买尔旦·马合木提^[8]等对新疆市售不同地区的紫草，采用紫外分光光度法、高效液相色谱法分别测定紫草中两个主要活性成分的含量，并以此为指标，进行含量分析。依据结果可见，新疆不同产区紫草的含量差异很大。

药典法鉴别只能初步区分紫草的性状、显微差异，无法综合评价紫草的质量，更看不出含量差异。而不同学者通过药典法联用薄层色谱法、紫外分光光度法、高效液相色谱法测定不同市场或同一市场不同地区药用紫草的萘醌类及阿卡宁成分的含量差异，并对不同温度、不同萘醌含量对紫草浸出物的提取效果进行研究，结果表明，目前市场紫草的质量差异很大，单凭药典法无法完全保障紫草的质量，缺乏统一的评价方法。

2.2 基原考证

基原考证通常是对研究主体的产地、炮制工艺、浸出物含量、主要化学成份以及对其相关指标的研究进展加以总结，如：紫草的基原考证。李卒等^[9]通过考证文献确定了藏紫草的基原，建立了薄层色谱鉴别法和高效液相色谱法测定藏紫草含量的质量标准研究方法，初步设定了藏紫草所含β,β'－二甲基丙烯酰阿卡宁的含量限度，增强了藏紫草的质量控制。陈钰沁^[10]等研究昆明滇紫草的名称、基源、性状鉴别、显微鉴别以及浸出物，为昆明滇紫草建立了全面的的质量标准研究项目。周健^[11]等研究紫草根、茎残基部位的化学成分。结果表明，10批紫草药材根与茎残基部分的薄层斑点数目、形状均保持一致，并且根的羟基萘醌含量大于茎的羟基萘醌含量，根为3.631%，而茎只有1.516%。说明新疆紫草根与茎残基部分所含成分基本一致，但不同药用部位所含化学成分含量差异很大。

根据基原考证，学者在理清藏紫草基原的基础上，确定以薄层色谱鉴别法和高效液相色谱法作为藏紫草质量标准的控制方法，规避了不符合标准的藏紫草作为药用紫草，为藏紫草进入市场的质量提供了保障；通过对昆明滇紫草设立检测项目，检测滇紫草的名称、基源、性状鉴别、显微鉴别以及浸出物等鉴别项，规范昆明药用紫草的质量；通过研究紫草根与茎所含萘醌含量的区别，得出紫草根的药用成分含量均优于茎，为紫草药用部位的临床应用起导向作用。

2.3 成分研究法

从现有的文献资料来看,几乎所有的质控标准的含量测定都选择测定一种或几种紫草的活性成分。测定方法有高效液相色谱法、高效液相色谱法联合质谱法、指纹图谱等多种方法,但就目前紫草的质量标准来说,首选方法还是高效液相色谱法。

2.3.1 高效液相色谱法

廖梅等^［12］采用高效液相色谱法，分析液相-质谱联用法（HPLC-MS）对22批次市售紫草样品的13个紫草素与呋喃类化合物的检测效果。结果表明，该方法检测准确，操作简便，是目前最普遍的用于药用紫草质量控制研究的方法。

2.3.2 指纹图谱法

江玲等^［13］建立了27 批次不同产地的细花滇紫草的指纹图谱，通过聚类分析结果显示，27批不同产地细花滇紫草及其变种药材指纹图谱相似度为0.92 -0.99，证明此方法可以作为细花滇紫草的质量标准参考。蔡鹰等^［14］采用HPLC－DAD法进行检测，作为新疆紫草药材的质控方法。结果显示10批次产地为新疆的紫草药材指纹图谱与对照指纹图谱的相似度均在0.921 ～0.987之间。7批西藏产新疆紫草与对照指纹谱相似度在0.7以上，3批内蒙紫草与对照指纹谱的相似度均在0.492－0.511之间。可见新疆紫草质量最好，藏紫草质量居中，内蒙紫草质量最次。米尔尼沙·阿不都热依木等^［15］研究紫草药材的高效液相色谱指纹图谱，并测定其中β-乙酰氧基异戊酰阿卡宁的含量。结果显示10批紫草药材指纹图谱的相似度均＞0.950。β-乙酰氧基异戊酰阿卡宁不同产地的含量差异较大，可见β-乙酰氧基异戊酰阿卡宁可作为紫草药材含量测定和指纹图谱研究的指标性成分。王宏等^［16］采用高效液相色谱法建立了10 批紫草闪式提取醇提物的 HPLC 指纹色谱图，获得了13个共有峰，并指认了其中的3 个色谱峰。说明该方法简便，精密度、重复性和稳定性良好，能有效控制紫草醇提物的质量，为进一步药效研究、制剂研发提供质量保证。

指纹图谱法是目前紫草质量研究使用最多的方法之一，学者可以通过它建立共有峰，判断不同产地紫草指纹图谱相似度。也可联用其他方法，测定紫草其他成分的含量差异，如：紫草醇提物、紫草β-乙酰氧基异戊酰阿卡宁含量，作为紫草含量测定的辅助指标性成分，为保障紫草质量提供物质基础，确保实验的精密度、重复性和稳定性。

2.3.3 多组分定量法

姜林等^[17]对7个不同产地的新疆紫草和3个产地的硬紫草建立了高效液相指纹图谱，并对不同产地紫草进行综合评价，多组分测定其左旋紫草素的含量。结果显示，不同产地左旋紫草素的含量差异较大。该指纹图谱能够作为有效鉴别新疆紫草的质量控制方法。辛玲^[18]采用以紫草素、乙酰紫草素、异丁酰紫草素、二甲基丙烯酰紫草素、异戊酞紫草素，乙基异戊酰紫草素为主的多种成分指标，建立硬紫草多组分定量法。结果表明，该方法简便、准确、重复性好。廖梅^［19］以新疆紫草、内蒙紫草和硬紫草为研究对象，以紫草素和紫草呋喃类为标准品，应用质谱裂解规律对混合样品中的所有紫草素和紫草呋喃类化合物进行系统鉴定，建立了紫草质量控制方法。阿呷尔布等^［20］对7批不同来源藏紫草的紫草素、乙酰紫草素、β，β'-二甲基丙烯酰紫草素的含量进行测定，对西藏地区不同来源的藏紫草药材的质量进行评价，7批药材中3 种萘醌类成分的含量差异巨大，表明市场上藏紫草药材质量差异大。陈璐璐等^［21］采用UPLC对紫草素、乙酰紫草素及β，β′-二甲基丙烯酰紫草素的含量进行测定。结果表明，紫草中活性成分的识别可以显著增强其质量控制的准确性和专属性。

多组分定量法是定性鉴别结合定量检测，对紫草药材的质量进行检测和控制的一种方法。学者可以通过设立不同产地的紫草为研究对象，建立紫草多种活性成分为指标，采用质谱裂解规律等方法对紫草质量进行综合评价，增强不同市场、不同产地紫草的质量控制。

2.4 其他方法

任阳阳等^［22］结合DNA 条形码鉴定发和组分含量测定法，作为紫草的质量控制方法。对11批新疆紫草进行基源鉴定，测出其中8种萘醌类含量。结果表明该方法准确、安全、重复性高。江玲^［23］采用高效液相色谱法结合近红外光谱法，建立不同产地细花滇紫草及其变种药材的指纹图谱。该方法稳定性较高，为当前中药材市场紫草的真伪鉴别以及合理开发与利用提供了参考依据。张蕾等^［24］应用毛细管电泳技术，可实现35 min 内新疆紫草有效成分的高效分离。为新疆紫草的质量控制与评价提供了一种新的快速有效的鉴别方法。

 DNA 条形码技术、近红外光谱法和毛细管电泳技术是近年学者进行紫草质量研究的新方法，目前应用越来越多，受到医药领域的广泛关注。相较于紫草普遍的含量测定法，它的优势在于准确、安全、重复性高，稳定性相对较高，并且用时较短，是目前较热门的紫草研究方法之一。

3 总结与展望  

近年来紫草的化学成分和质量控制方法的研究从未停止过,不断的有新的成分被发现，新的方法被应用。但紫草的质量控制方法并没有因研究的深入而变得越来越容易。目前医疗机构紫草饮片用量较大，而市场紫草饮片含量差异太大，对紫草制剂的稳定性及临床疗效都有较大的影响。     

因此，只有加强紫草全过程的质量控制,同时，不断更新方法，制定统一的市场药用紫草评价体系，才能更好的保证药用紫草的高效、均一、稳定和可控。建议在考察不同产地紫草的含量标准时，增加更多活性成分为辅助指标，建立市场紫草以药典法、基原考证、成分研究法、其他方法为一体的综合评价体系。并同时针对紫草的含量标准设限，提高药用紫草含量标准的最低限度，同时适当设定高限，增强市场紫草的质量控制，保障临床疗效。

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