经颈外静脉置管制作SD大鼠CRT模型不同

导管固定方法的比较研究

韦艳  甘晓  赵慧函  应燕萍 

（广西医科大学第一附属医院，南宁  530021）

摘要  目的：比较大鼠颈外静脉置管术后两种不同导管固定方法的优缺点。方法：将30只清洁级SD大鼠随机分为A、B两组，每组15只。A组：暴露、切开右颈外静脉，置入大鼠颈静脉硅胶导管，导管末端予堵头封管，取适宜长度埋于手术切口皮下，缝合固定。B组：置管、封管方法同A组，将导管从颈背部皮下隧道引出，固定于颈背部。观察两组大鼠术中出血量、手术时长、麻醉药物用量、麻醉苏醒时长及术后7d大鼠导管脱出情况。结果：A组大鼠术中出血量、手术时长、麻醉药物用量、麻醉苏醒时长与B组比较差异有统计学意义(P<0.05）。A组术后7d均无导管脱出，B组术后7d有3只大鼠出现导管脱出。结论：A组固定方法较B组更简便、易行，术中出血量少，手术时间短，麻醉药物用量小，苏醒快。导管埋入皮下，不易脱出，但不利于经静脉导管给药。B组将导管固定于颈背部，虽有不足，但具有近似模拟临床中心静脉血管通路，还可通过静脉导管给药，进行不同的试验干预等优点。

关键词  颈静脉；置管术；固定；大鼠

基金项目：国家自然科学基金（项目批准号：81860032） 

作者简介：韦艳，在读硕士研究生，护师。

Comparison two methods of catheter fixation after external jugular

vein catheterization for CTR models in Sprague-Dawley rats

Wei Yan   Gan Xiao  Zhao Hui han  Ying Yan ping

(The First Affiliated Hospital of Guangxi Medical University,Nanning 530021,china)

[Abstrat] Objective : To compare the advantages and disadvantages of two different catheter fixation methods after external jugular vein catheterization in rats. Methods: Thirty clean Sprague-Dawley rats were randomly divided into two groups, A and B, with 15 rats in each group. Group A: Exposure, incision of the right external jugular vein, Insertion of the rat jugular vein silicone catheter, the end of the cathettaneous tunnel at the back of back and fixe to the back of the neck. Obserer was sealed by a plug, and take a suitable length and bury it under the skin of the surgical incision. Group B: The method of catheterization and sealing was the same as that of group A. Take the catheter out of subcuve the amount of intraoperative blood loss, duration of surgery, amount of anesthetic drugs, duration of anesthesia recovery, and catheter outbreak of rats 7 days after operation.Results: The amount of intraoperative blood loss, duration of surgery, amount of anesthetic, and length of anesthesia in group A were significantly different from those in group B (P<0.05). There was no catheter out at 7 days after operation in group A, and catheter out occurred in 3 rats at 7 days after operation. Conclusions: The fixation method of group A is simpler and easier than of group B. The intraoperative blood loss is smaller, the operation time is shorter, the amount of anesthetic drugs is less, and the recovery is faster than group B. Because the catheter is buried under the skin, it is not easy to escape, but it is not suitable for intravenous catheter administration. In group B, the catheter was fixed to the back of the neck. Although there were insufficient, it had the advantage of simulating the clinical central venous vascular access, and it can also be administered through intravenous catheters for different experimental interventions.

[Key words]：Jugular vein;  catheterization;  fixation;  rat

随着中心静脉血管通路装置（Central Venous Access Device, CVAD）在临床上的广泛应用，越来越多的学者开始重视CVAD的并发症。有的并发症如导管相关性血栓（Catheter-related thrombosis, CRT）可以引起深静脉血栓形成、肺栓塞，从而危及患者生命。因此，有效制作CRT动物模型，并进行相应的试验干预，为临床CRT患者提供有价值的研究，势在必行。本实验采用大鼠颈外静脉置管制作导管相关性血栓模型，术后用两种不同的方法固定静脉导管，观察两种固定方式的优缺点。现将实验结果报告如下。

1  材料与方法

1.1 材料

1.1.1 实验动物

清洁级健康Sprague-Dawley（SD）大鼠30只，雄性，体重180-240g，由广西医科大学实验动物中心提供，实验动物生产许可证号：SYXK桂2014-0002，实验前适应性分笼饲养1周，均给标准饲料喂养，自由饮水。采用随机数表法将SD大鼠随机分为两组：A组（n=15）和B组（n=15）。

1.1.2 实验材料

小鼠颈静脉插管（硅胶）1＃（思科诺生物科技（北京）有限公司）、不锈钢堵头（思科诺生物科技（北京）有限公司）、显微血管手术器械（广西医科大学动物实验中心提供）、一次性使用无菌注射器：1ml（浙江灵洋医疗器械有限公司）、缝合针（上海信成医疗器械有限公司）、4-0非吸收性外科缝线(江苏信迈缝合材料有限公司）、水合氯醛（天津市大茂化学试剂厂）、0.9%氯化钠注射液:100ml(石家庄四药有限公司）、注射用青霉素钠：80万单位（华北制药股份有限公司）、碘伏（广西北仑河医科工业集团有限公司）、棉签（广西北仑河医科工业集团有限公司）、外科纱布敷料（稳健医疗用品股份有限公司）、一次性使用手术单（南昌市通达医疗器械有限公司）、BL-1000-X电子天平（厦门佰伦斯电子科教有限公司）、大鼠固定台（自制）。

1．2  方法

1.2.1  颈外静脉置管

随机分组、编号后取SD大鼠称重。A、B组均参照Smith等^[1]置管手术方法进行适当修订，以10％水合氯醛(按0.35 ml／100 g计算)行大鼠腹腔内注射进行麻醉，待麻醉满意后，将大鼠仰卧位固定于操作台，备皮、消毒，沿颈中线偏右侧作一纵行切口，长约2cm,依层切开皮肤，皮下组织，用显微镊于皮下作钝性分离，显露右颈外静脉，完全游离血管，长约1～1.5cm，在血管下穿过并摆放2根4-0号线，一根结扎右颈外静脉远心端，另一根放置于近心端备用，用显微镊提起右颈外静脉血管外膜，眼科剪在静脉管壁上全层剪一个“V”形小口，约占静脉周长的1/3-1/2，术者右手用1ml注射器针头改装成的“鱼钩样”针头，针头尖端于静脉切口处将血管轻轻向上勾起形成一个开口，左手持血管镊辅助将开口撑大，此时由助手将末端连接有1ml注射器的大鼠颈静脉硅胶导管置入2-2.5 cm，推抽与导管末端连接的注射器，可见有血液回流且推注顺畅后（图1），立即予青霉素4万U抗感染，并予生理盐水冲管后，导管末端用不锈钢堵头封管。于导管上第一个小凸起处（距管尖约2cm），以4-0号线结扎固定近心端导管；在导管第二个小凸起处（距管尖约2.5cm）再次结扎固定导管远心端,松紧适宜并将导管连同附近的少许肌肉缝合固定2～3针。

1.2.2  导管固定

在完成上述置管步骤后，A组：将导管远心端（末端）取适宜长度埋于手术切口皮下（图2），缝合切口进行固定。B组：大鼠取俯卧位，在颈背部剪一约2cm的切口，用直血管钳自颈部手术切口处向上于颈背部皮下穿出造皮下隧道，钳夹硅胶管在颈背部引出，皮肤外预留2-2.5cm，于颈背部将导管用4-0丝线缝合3-4针固定（图3）。术后手术伤口均予碘伏消毒。

图1：有回血，置管成功

图2：导管直接埋于手术切口皮下（箭头所示）  图3：导管固定于颈背部（箭头所示）

1.2.3  术后护理

所有实验大鼠术后予电暖器复温、保暖，保持环境温度在24℃左右。待麻醉清醒后， A组给予正常群居饲养，B组则单只单笼饲养。术后7d，碘伏消毒手术切口，每天一次，并观察大鼠导管脱出情况。

1.2.4  统计学方法

采用SPSS17.0统计软件，两组大鼠术中出血量、手术时长、术中10%水合氯醛麻醉药物用量及术后麻醉苏醒时长用均数±标准差表示，用t检验进行统计学分析。P<0.05为差异有统计学意义。

2  结果

A组大鼠术中出血量0.42士0.15ml，B组术中出血量1.08士0.31ml，两组比较差异有统计学意义(P<0.05）。A组大鼠手术时长30.40士3.48min，B组手术时长46.20士5.16min，两组比较差异有统计学意义(P<0.05），见表1。A组术中10%水合氯醛麻醉药物用量0.73士0.05ml，B组术中10%水合氯醛麻醉药物用量0.85士0.11ml，两组比较差异有统计学意义(P<0.05）。A组术后麻醉苏醒时长52.27士4.06min，B组术后麻醉苏醒时长61.27士7.36min，两组比较差异有统计学意义(P<0.05），见表2。A组术后7d均无导管脱出，B组术后7d有3只大鼠出现导管脱出。

表1两组术中出血量和手术时长的比较（±S)

P<0.05；^a与A组比较，P<0.05；^b与A组比较，P<0.05。

表2两组麻醉药物用量和术后麻醉苏醒时长的比较（±S)

P<0.05；^a与A组比较，P<0.05；^b与A组比较，P<0.05。

3  讨论

中心静脉血管通路装置（Central Venous Access Device, CVAD）目前已广泛应用于重症监护病房和慢性疾病人群，尤其是肿瘤患者^{[2, 3]}。尽管CVADs具有很多优点，但也存在许多并发症，其中导管相关性血栓（Catheter-related thrombosis, CRT）是最严重的并发症之一，它可以引起肺栓塞，再发性深静脉血栓、血栓后综合征和败血症等，严重者甚至危及患者生命^[4]。出于伦理等因素考虑，研究者很难获得CRT患者的静脉组织或血栓进行研究，因此，制作CRT动物模型是研究CRT发病机制必要的替代方法。

有文献报道^[5]，大约有18种动物可用来制备实验性静脉血栓形成模型，常用的动物有：犬、兔、大小鼠等。由于大鼠具有手术耐受性强、可操作性高、术后恢复和培养繁殖快、价格低等特点，是一种较理想的实验动物。实验性静脉血栓动物模型的建立方法很多，有机械损伤法、静脉异物法、静脉结扎法、光化疗法、血栓诱导药物致栓法等^[6]。目前，国内外用深静脉导管构建动物CRT模型的报道很少，因此本实验选用SD大鼠作为实验动物，取其右颈外静脉进行置管，制作大鼠CRT模型，用两种不同的方式固定颈外静脉导管，观察两种不同的固定方式各自的优缺点。

研究发现，A组静脉导管固定方法相对于B组，具有简便易行、术中出血量少、手术时间短、对大鼠的刺激小、术中无需再次追加麻药、麻醉药物用量少、大鼠术后苏醒快等优点（两组比较P<0.05）。而且，因大鼠生性好动，善于撕咬，将导管末端直接埋于手术切口皮下，可以避免大鼠撕咬，降低导管脱出率，还可以群居饲养，节约实验成本。但A组导管固定方式也有其缺点，由于导管埋入大鼠切口皮下，不能经过静脉导管给药，在大鼠CRT造模成功后不能通过导管进行有效的试验干预。B组固定方式将导管从手术切口周围经皮下隧道引出，于颈背部进行固定，此方法虽然较A组复杂，手术时间延长，术中出血量增加，并且在构建皮下隧道时，往往因对大鼠刺激强度加大，大鼠疼痛易躁动，需再次追加首次计量1/4麻药，致使术后麻醉苏醒时间延长。但该方法有以下一些优点：（1）近似模拟临床中心静脉血管通路装置（Central Venous Access Device, CVAD）的置入，使大鼠CRT模型更符合临床患者CRT的病理生理学特点。（2）此固定方法可以从固定在体外的静脉导管给药，便于在CRT模型制作成功后，通过静脉给药，进行不同的试验干预，为临床CRT患者提供有借鉴意义的预防和治疗方法。这些优点是A组固定方法所不能提供的。

总之，A、B组两组静脉导管的固定方法各有其优缺点，研究者可以根据不同的实验目的选择合适的固定方法。

参考文献：

[1]Smith MA, Schmidt KT, Iordanou JC, Mustroph ML. Aerobic exercise decreases thepositive-reinforcing effects of cocaine[J]. Drug Alcohol Depend, 2008,98 (1-2):129-135.

[2]Gavin NC, Webster J, Chan RJ, et al. Frequency of dressing changes for central venous access devices on catheter-related infections. Cochrane Database Syst Rev, 2016,2CD009213.

[3]Broadhurst D, Moureau N, Ullman AJ. Central venous access devices site care practices: an international survey of 34countries. J Vasc Access, 2016,17(1):78-86.

[4]Grant JD, Stevens SM, Woller SC, et al. Diagnosis and management of upper extremity deep-vein thrombosis in adults. Thromb Haemost, 2012,108(6):1097-1108.

[5]Marcel Levi,Janine Dorffler-Melly,Gerhard J,Johnson,et al.Usefulness and Limitation of Animal Models of  Venous Thrombosis[J].Thromb Haemost,2001,86：1331.  

[6]刘政，张玥，侯玉芬.深静脉血栓形成动物模型的研究进展[J].中华中医药学刊，2010,28（1）：57-59.