T细胞亚群在原发性干燥综合征发病机制中的研究进展

        王瑞婷¹  陈雁飞² 汪钰涵¹ 陈卫红¹

摘要：原发性干燥综合征(primary Sjogren’s syndrome，pSS)是以口干、眼干为突出表现的慢性自身免疫性疾病，病理特征为外分泌腺灶性淋巴细胞浸润。其对人体各个器官系统均能造成损害，严重影响患者生活质量。多数研究显示T细胞参与了pSS的发生发展，故其可能对pSS的早期诊断有重要意义。为探讨T细胞在pSS发病中的作用机制，寻找新的具有高特异性与灵敏性的pSS检测指标，本文就T细胞不同亚群在pSS发生机制中的国内外研究进展进行综述。

关键词：原发性干燥综合征;T细胞;综述

原发性干燥综合征(primary Sjogren’s syndrome，pSS)是一种以侵犯泪腺、唾液腺等外分泌腺，并可累及肺、肾脏、肝脏以及血液系统等多个脏器为特征的慢性自身免疫性疾病。我国的pSS患病率为0.29%-0.77%，并呈上升趋势，其多脏器受累严重影响患者的生活质量。pSS发病机制涉及遗传、免疫、环境等多种因素，但其具体的发病机制至今仍未完全清楚。近年来，国内外多项研究发现pSS的发病与T细胞亚群有关。T细胞可通过分泌IL-4、IFN、IL-17等细胞因子发挥其负向免疫调节功能，并参与诱导B细胞活化、增殖、抗体产生和免疫球蛋白的类别转换等，参与pSS的发病。现将T细胞亚群在pSS发病机制中的国内外研究进展综述如下。

1.CD4⁺T细胞亚群

T细胞根据其表面辅助受体的不同可分为CD4⁺T细胞和CD8⁺T细胞。CD4⁺T细胞在不同细胞因子诱导下可分化为辅助性T细胞（T helper cell,Th细胞），包括Th1细胞(T help cells-l，辅助性T淋巴细胞1)、Th2细胞(T help cells-2，辅助性T淋巴细胞2)、Th17细胞(T help cells-17，辅助性T淋巴细胞17)、Tfh细胞（T follicular helper cell,滤泡辅助性T细胞）等。

CD4⁺T细胞与自身免疫性疾病的发生关系密切^[3－8]，在系统性红斑狼疮、类风湿关节炎、银屑样皮肤病等自身免疫性疾病中发挥重要作用。在pSS患者的唾液腺中检测到大量CD4⁺ PD1⁺T细胞（一种新的T细胞亚群），而正常唾液腺和肾活检组织中未检测到CD4⁺PD1⁺T细胞。pSS患者唾液腺中CD4⁺T淋巴细胞自噬增强及体内CCR7 CD4⁺T细胞频率增加，与病灶积分和疾病活动相关，这些都表明CD4⁺T细胞可能参与了pSS的发病。

1.1.Th1细胞

γ干扰素（IFN-γ）是Th1的标志性细胞因子，历史上，由于Th1细胞及其产物，即干扰素-γ（IFN-γ）在pSS患者的靶器官和外周血中占优势，pSS被认为是一种Th1驱动的疾病^[9]。Sudzius G^[10]等人首次发现与对照组非干燥综合征（nSS）组相比，pSS患者中产生IL-17和IFN-γ的Th1 / Th17样细胞的比例显著增加。Th1/Th2的失衡导致pSS的发生和发展。Th1细胞和靶器官通过产生不同的细胞因子、共刺激分子、激活Fas/Fas-L信号通路，在疾病的诱导和维持过程发挥关键作用，最终导致靶器官的破坏。这与IFN-γ能促进唾液腺上皮细胞的凋亡和分泌功能失常相关，并且与IFN-γ可以增强唾液腺的抗原提呈细胞呈递抗原，从而进一步激活T细胞密切相关^[11-12]。胸腺基质淋巴细胞生成素（Thymic Stromal Lymphopoietin，TSLP）是一种有效的免疫调节细胞因子，参与Th2和Th17介导的各种自身免疫性疾病的免疫应答。 Hillen^[13]认为TSLP能通过促进Th2活性来介导耐受，从而阻止Th1和Th17驱动的炎症活动。而在pSS患者中TSLP表达的丧失导致疾病活动增加可能与Th1/Th17相关的免疫病理有关。

1.2. Th2细胞

Th2细胞通过刺激B细胞的分化、增殖及产生免疫球蛋白影响pSS的淋巴细胞浸润。Th2细胞可诱导幼稚B细胞分化为成浆细胞，促进IgG4的产生。IL-4是Th2的标志性细胞因子，最初被认为是一个抗炎因子，后在对系统性红斑狼疮的研究中，发现IL-4能促进靶器官的炎症反应，增加IgG和IgE的产生，是疾病不可或缺的炎性因子。在pSS病人的唾液腺中可以检测到IL-4的高表达，特别是唾液腺中出现高度B细胞聚集的患者^[14-15]。

1.3. Th17细胞

Th17细胞以分泌IL-17、IL-6、TNF-α等细胞因子为特征，能募集和激活中性粒细胞，并参与自身免疫和炎性疾病的发病。研究显示^[16-25]，活化的Th17细胞在pSS患者的外周血、唾液腺及唇腺组织均有较高的表达率，并表现出限制Th1和Th17 TCR的功能。将实验组按Chisholm标准进行分级，发现Th17的表达与淋巴细胞浸润的程度呈正相关。并认为Th17的分化增加是由IL-2缺乏所致。提示可从IL-2入手抑制Th17细胞的分化增值，从而对自身免疫性疾病有更深理解。发现pSS患者增加的Th17与自身抗体IgG、IgM、抗SSA抗体、抗SSB抗体成正相关。

1.4. Tfh细胞

Tfh细胞是最近发现的CD4⁺辅助性T淋巴细胞亚群，多项研究表明其参与pSS发病。Tfh细胞表面标志为CXCR5，是Tfh细胞的表面趋化因子受体，与配体CXCL3作用后和B细胞相互接触，促进B细胞的增殖、分化、免疫球蛋白类别转换，从而参与免疫应答^[25]。Tfh同时表达CD4OL、ICOS及PD-1等分子，IL-21是其最主要的细胞因子，主要作用是辅助B细胞产生抗体^[26]。

Tfh细胞可能在pSS的严重程度中起重要作用，pSS患者外周血Tfh细胞百分比增加，病程越明显。Szabo K^[27]发现pSS患者外周血Tfh细胞的百分比升高与某些B细胞亚型比例与自身抗体水平之间存在明显的相关性,且唾液腺中循环Tfh细胞频率的升高可能与腺体受累的严重程度有关。

循环CD4+ CXCR 5+ ICOS+ PD-1+ Tfh细胞百分比在pSS中升高，而糖皮质激素和/或免疫抑制剂可使CD4+CXCR 5+Tfh细胞百分比下降。Tfh细胞比例较高的患者血清IL-21也升高，Tfh和IL-21可能是唾液腺上皮细胞尚未知的致病基因作用的相关生物标志物,且Tfh细胞与B细胞的特殊亚群之间有复杂的相互作用。pSS组患者唇腺组织中CXCR5、IL-21的表达也增高，且其与组织中细胞凋亡数呈正相关，提示Tfh细胞可能参与细胞凋亡，进而与pSS的发病机制密切相关^[25-30]。

1.5. Treg细胞（regulatory T cell，调节T细胞）

Treg细胞是执行负向调节作用的一类特殊T细胞亚群，在维持免疫耐受和免疫应答的负调节中发挥重要作用。Haskett^[8]等在pSS的非肥胖性糖尿病（non-obese diabetic,NOD)小鼠模型的炎症性泪腺组织中发现Tregs群体是最丰富的CD4+ T细胞亚群，在免疫浸润高峰时占整个群体的50%。现已发现多种Treg细胞亚群在pSS发病中起重要作用，但研究结果结论并不一致。研究发现^[31-32]，pSS患者外周血CD4⁺CD25^+high调节性T细胞占CD4⁺百分比显著低于健康组，且与活动性指标CRP及IgG呈负相关。提示pSS患者外周血CD4⁺CD25^+high调节性T细胞的表达不仅与pSS发病有关，且与病情活动有相关性。而另一项研究则显示CD4⁺CD25^+higT细胞在pSS组与对照组中无太大差异，反而CD4⁺CD25⁺FOXP3T细胞与CD4⁺CD25⁺CD127^low/-T细胞在pSS患者的水平明显降低，使抑制自身免疫的功能异常而引起自身免疫病^[33]。在适当的刺激下，Treg细胞可以转化为Th17细胞。而参与pSS的发病。

综上所述，CD4+T细胞亚群在pSS发病中有重要作用。近年来关于Th1、Th2细胞与pSS关系的研究较少，Treg的具体作用存在争议，而Tfh、Th17在pSS中的作用越来越受到广泛关注，但研究还需进一步深入。总之，CD4+T细胞亚群数量庞大，未来有待发现更多其在pSS发病中的作用机制。

2.NKT细胞(natureal kill T cell，自然杀伤性T细胞）

NKT细胞既表达T细胞表面标志如CD3、TCRαβ/γδ，又表达NK细胞的表面标志如CD16、CD56、CD57等，兼具两者特性，是一群桥接固有免疫与适应性免疫的特殊细胞^[34]。目前关于NKT细胞在pSS中的作用机制研究较少，且颇具争议。国外研究发现^[35-37]，外周NKT细胞数目减少，唾液腺中iNKT的缺失可能导致B细胞活化和产生抗SSA抗体。如此的结论与该细胞比例在人群中的广泛变异性，研究对象的数量、人种，疾病不同的时期或治疗情况，以及所采用探测方法等有关。国内研究发现^[38-40]，与健康对照组相比，CD3⁺CD56⁺NKT-like细胞在pSS患者外周血中显著减少，而在唇腺中明显增多，提示NKT细胞可能迁移至受损的唇腺组织中发挥作用，并通过分泌IFN-γ、TNF-α等Th1型细胞因子加速唾液腺的损害，导致腺体萎缩、功能下降。以6B11抗体标记iNKT细胞，实验发现pSS患者外周血iNKT细胞比例低于健康对照组，而在唇腺组织中有少量表达。由于现有研究较少，并不能确定NKT细胞是导致疾病发生的原因还是疾病带来的结果。

3.γδT细胞

γδT细胞是执行固有免疫的T细胞，其TCR由γ和δ两条肽链组成，缺乏多样性，同时也是分泌IL-17的一类重要亚群，起着连接固有免疫和适应性免疫的作用^[41]。γδT细胞主要有三个细胞亚群，以Vδ1和Vδ2亚群为主，在功能上各有差异。γδT细胞可以抗感染，维护固有免疫，抗肿瘤。研究表明γδT细胞与自身免疫疾病的发病有关^[42-43]。γδT细胞是类风湿关节炎患者滑膜液中T细胞系中的主要群体。与健康对照组和原发性胆汁性肝硬化疾病对照组相比，pSS患者外周血Vδ2细胞分别在CD3+淋巴细胞与γδT细胞中的比例明显下降，且pSS患者外周血淋巴细胞中Vδ2细胞所占比例与基于ESSDAI评分的疾病活动程度呈线性负相关。由此推测，γδT细胞在pSS患者外分泌腺体的浸润对于腺体破坏、疾病发生起到了一定作用。

4.CD8+T细胞

CD8+T细胞参与pSS发病。Gravano^[44]认为CD8+T细胞通过调节炎性细胞因子的分泌，扭曲分化曲线和不适当诱导靶细胞凋亡，以及阻断呼吸暂停等途径，可以促进自身免疫性疾病的发生。也可通过消除自我活跃的细胞和自身抗原来源，或通过调节性T细胞来阻止这类疾病发生。Narkeviciute^[45]研究发现与类风湿关节炎和继发性干燥综合征研究组相比，pSS组CD8+群体和CD8+^highCD45RA⁺T细胞亚群的高频率，系由病毒感染引起。CD8 +T细胞在pSS患者外周血中明显减少。推测CD8+ T细胞缺乏可通过抑制CD8 T细胞对病毒感染的控制，促进慢性自身免疫性疾病的发展^[35-36]。而pSS患者CD8+CD28-T细胞比例明显增高，且与pSS症状的严重程度及皮肤和肌肉系统疾病活动密切相关^[46]。

5.其他

随着对pSS研究的深入，研究者们还发现了其他一些非常见T细胞可能参与pSS发病机制^[47-48]。比如在pSS患者的外周血中粘膜相关不变T（MAIT）细胞减少并且表型和功能改变。CD4-CD8-T（DN T）细胞广泛浸润在外周血与腺体组织中，且其在腺体组织中所占的比例与循环DN细胞呈负相关。而DNT细胞亚群在pSS唾液腺慢性炎症的发展过程中起着重要作用，并对pSS患者的皮质类固醇治疗具有部分耐药性^[48]。

综上所述，作为重要的免疫细胞，T细胞亚群生物学特性和功能越来越受到关注。国内外研究显示，T细胞亚群参与了pSS的腺体受累、靶器官损害等，并与疾病活动相关。相信随着对T细胞亚群在原发性干燥综合征发病中的作用机制研究的不断深入， T细胞亚群对于pSS的诊断、疾病活动度、新的靶点治疗以及预后都将有着重要意义。

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