河北省2018年四种猪病毒病血清抗体的检测与分析

李桂霞，谈春季，史向向，肖云龙

（石家庄飞龙（集团）饲料有限公司，河北 石家庄 050071）

摘要：采用ELISA方法，对河北省张家口、保定、石家庄、邢台、邯郸、廊坊、沧州及衡水8个地区不同猪场481份母猪血清，检测猪瘟(CSF)、猪繁殖与呼吸障碍综合征（PRRS)、伪狂犬野毒（PRV-gE）、圆环病毒2型(PCV₂)的抗体水平。结果表明：圆环免疫效果最好，各地区的差异不大，猪瘟和蓝耳免疫阳性率较高，但各地区间抗体水平差异较大，PRV-gE抗体均较低，且地区间差异较大。猪瘟和伪狂犬疫苗的免疫普及度极高，猪瘟的免疫效果确实，但伪狂犬的不理想；猪圆环和蓝耳抗体与是否接种疫苗没有线性关系。

关键词：猪瘟；猪繁殖与呼吸综合征；猪伪狂犬病；猪圆环病毒病；ELISA 

The Detection of Antibodies of 4 Porcine Viral Diseases from 8 regions of Hebei province in 2018

LI Gui-xia，TAN Chun-ji，XIAO Yun-long，SHI Xiang-xiang

Abstract: Applying enzyme-linked immuno sorbent assay(ELISA) for detection of antibodies to the classical swine fever virus(CSFV), porcine pseudorabies virus (PRV), porcine circovirus infection(PCV)，porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV)in total 481 serum samples from 8 regions of Hebei province. The results showed that the PCV₂ immune effect is the best,there is little difference between regions, CSF and PRRS immune positive rate is high, but the level of antibodies among regions is large, PRV-gE antibodies are low, and the regional differences are large. The immunization prevalence of swine fever and pseudo-rabies vaccine is extremely high, and the immune effect of swine fever is true, but the pseudo-rabies dog is not ideal; There is no linear relationship between swine ring and blue ear antibodies and vaccination.

Key words: CSF ; PRRS; PR; PCV ;ELISA

猪圆环病毒病(PCV₂)、猪繁殖与呼吸综合征（PRRS)、猪瘟(CSF)及猪伪狂犬病（PR）均是严重危害养猪业健康发展的重要病毒性传染病。怀孕母猪感染PCV₂后，会产生繁殖障碍，受孕率低或不孕，并可经胎盘垂直传播感染仔猪；猪繁殖与呼吸综合征（PRRS)临床上是以母猪的繁殖障碍和仔猪的呼吸道症状为主要特征；猪瘟(CSF)感染妊娠母猪后，母猪基本无症状，随着病毒随血液流进胎猪后，会出现木乃伊胎、流产和死胎，但影响程度会随着妊娠期延长而减弱，不发生垂直传播；猪伪狂犬病（PR）主要导致母猪的繁殖障碍和商品猪的呼吸综合征，母猪可产死胎、木乃伊胎和流产；对仔猪危害最严重，死亡率可达100%。

河北省目前养猪场规模在几十头到几百头母猪的家庭农场占有较大比重，为了了解河北省中小型自繁自养猪场上述四种病毒病的免疫情况，对河北省不同区域的猪群进行这4种病毒病的抗体检测，不仅可以及时掌握猪群免疫抗体水平，评价免疫效果，同时为科学制定免疫程序及评估猪场疫病净化程度，以及总体评估河北省中小规模猪场这四种病毒病的免疫情况具有重要意义，并为更多中小型养猪场的疫病防控提供参考。为此，石家庄飞龙（集团）饲料有限公司疾控中心，对采自河北省张家口、保定、石家庄、邢台、邯郸、廊坊、沧州及衡水8个地区飞龙财富共同体平台不同规模猪场(60-200头存栏母猪）的481份母猪血清进行了PCV₂、PRRS 、CSF及PR-gE抗体的检测进行分析总结。

1 材料与方法

1.1 待检血清   2018年11月1日-11月20日，分别采自河北省张家口、保定、石家庄、邢台、邯郸、廊坊、沧州及衡水8个地区不同中小型规模猪场的健康母猪血液分离的血清，共计481份，见表1。

1.2 酶标仪及检测试剂盒  酶标仪为深圳雷杜生命科学股份有限公司公司生产；检测四种猪病抗体的试剂盒均购自武汉科前动物生物制品有限责任公司。

1.3 试验方法及判定标准  

1.3.1圆环

（样品孔OD_630mm值-阴性对照孔的平均OD_630mm）/（阳性对照孔的平均OD_630mm值_--阴性对照孔的平均OD_630mm）≥0.16，判为阳性；

（样品孔OD_630mm值-阴性对照孔的平均OD_630mm）/（阳性对照孔的平均OD_630mm值_--阴性对照孔的平均OD_630mm）<0.16，判为阴性。

1.3.2 猪繁殖与呼吸综合征

结果用PRRS表示，PRRS=样品孔OD_630mm值/阳性对照孔的平均OD_630mm值*100

若PRRS≥20，判为阳性；若PRRS<20，判为阴性。

1.3.3 猪瘟

结果用CSF表示，阻断率=（1-样品孔OD_630mm值/阴性对照孔的平均值OD_630mm）*100%

若被检样品的阻断率≤30%，该样品判为CSF抗体阴性，被检样品的阻断率≥40%，该样品判为CSF抗体阳性；若被检样品的阻断率30%-40%之间，该样品判为CSF抗体判为可疑。

1.3.4 伪狂犬

样品孔OD_630mm值/阴性对照孔的平均OD_630mm≤0.35，样品判定为阳性。

样品孔OD_630mm值/阴性对照孔的平均OD_630mm≤0.4但>0.35，样品判定为可疑。

样品孔OD_630mm值/阴性对照孔的平均OD_630m>0.4，样品判为阴性。

2 结果与分析

2.1 不同地区4种猪病抗体检测结果   

对不同地区猪病抗体检测结果如图1所示，尽管不同地区猪圆环病毒病(PCV₂)、猪繁殖与呼吸综合征（PRRS)、猪瘟(CSF)及猪伪狂犬野毒（PRV-gE）水平有所差异，但总体来说8个地区的PCV₂免疫阳性率均较高；CSF和PRRS阳性率均较高但水平波动较大，抗体水平参差不齐；这些地区猪伪狂犬野毒猪感染情况不容乐观，相关地区猪场应该着重采取有力措施进行伪狂犬病gE野毒的净化。

2.2  4种猪病抗体总体检测结果

对481份血样分别进行PCV₂、PRRS 、CSF及PR-gE抗体检测, 其平均阳性率分别为99.58% (479/481)、85.03% (409/481)、91.89% (442/481)和40.96%（197/481）,由表1结果可知，PCV₂和CSF疫苗总体免疫效果确实,合格率较高；PRRS阳性率较高；PR疫苗免疫效果不佳, 合格率低。部分猪场还出现了同猪携带两种或以上病毒的，应加强猪群保健、疫苗免疫工作。

表1 四种猪病毒病抗体检测结果

2.3 免疫与未免疫猪4种猪病抗体检测结果

表2免疫和未免疫对抗体阳性率影响

从表2检测结果来看，猪圆环疫苗的接种率是84%，接种疫苗猪中阳性率可达99.50%，未接种圆环疫苗中呈现阳性率可达100%；猪蓝耳疫苗接种率是44%，接种疫苗猪中阳性率为86.79%，未接种蓝耳疫苗占55.9%，检测蓝耳抗体阳性率为84.01%，与接种疫苗相比少了2%。所有调查猪场都进行了猪瘟和伪狂犬这两种疫苗的接种，猪瘟疫苗接种后的阳性率91.48%，而猪伪狂犬接种后PR-gE抗体阳性率只有28.27%，感染伪狂犬野毒的可能性很大，伪狂犬疫苗的免疫效果不佳，可能跟免疫程序及免疫抑制疾病等因素有关，应引起足够的重视。

3小结

检测结果表明，8个地区的猪圆环疫苗免疫效果最好，各地区的差异不大，猪瘟和蓝耳免疫阳性率较高，但各地区间抗体水平差异，PRV-gE抗体均较低，且地区间差异较大。猪瘟和伪狂犬疫苗的免疫普及度极高，猪瘟的免疫效果确实，但伪狂犬的不理想；猪圆环和蓝耳抗体阳性率与免疫疫苗与否无相关性。

4 讨论

依据检测结果，中小型规模猪场应该重视猪伪狂犬病的免疫且效果确实，伪狂犬野毒一旦感染会终生带毒，生产中若PRV-gE阳性母猪，建议及时淘汰。猪蓝耳的免疫效果不理想，可能与近年来猪群免疫抑制性疾病增多、毒株变异、疫苗质量不稳定及免疫程序不合理等客观因素有关。猪场应根据实验室诊断及猪场实际情况采取适当的措施，尽量做到早发现、早治疗，使猪场健康、稳定发展。

我们在养殖服务中碰到仔猪发生呼吸症状或是腹泻，给药或是按照营养方案治疗均无明显效果时，因圆环、蓝耳、伪狂犬病病毒均可通过母猪进行垂直传播，因此建议可考虑是否有以上病毒病。