马铃薯脱毒苗高效快捷低成本繁育技术的研究

曾亚红    张勇   张绍荣   吴美玲   曾世文

（1.贵州恒丰科技开发有限公司，贵州省威宁县  551300

2.毕节市农业科学研究所，贵州省毕节市  551700)

摘 要：本试验着重对马铃薯脱毒苗快繁技术进行探索，从培养基形态和用量方面进行探索研究。结果表明：利用MS液体培养基每瓶（250ml广口培养瓶）放置15ml可以培育壮苗，成本比以往所用的MS固体培养基降低40%以上。

关键词：马铃薯；脱毒微型薯；快繁技术

前言：威宁县是贵州省马铃薯种源基地县。种薯产量和质量是保障全省马铃薯生产的重要因素。利用生物技术与无土栽培技术相结合，规模化生产马铃薯脱毒原原薯是当前国内外繁育健康种薯的有效途径。如何显著提高原原种薯的产量和质量，促进马铃薯种薯生产走向产业化，是当前马铃薯产区生产上一直追求和关注的问题。脱毒苗源是脱毒种薯生产的基础,可是扩繁试管苗这一环节成本太高，造成下一级原原种生产成本也高，级级影响，最终商品种薯生产成本高，相应的售价就高，严重影响脱毒马铃薯的推广应用。为了降低生产成本 ，我们进行了本试验研究，拟为马铃薯脱毒种苗生产者提供技术参考。

1.材料和方法

1.1材料

供试品种为恒薯1号，由本公司组培实验室提供脱毒种苗作为试验材料。

1.2方法

1.2.1 用MS液体培养基不同用量对马铃薯脱毒苗进行组培快繁，设250 m1广口瓶放人培养液10ML为处理A、15ML为处B、20ML为处理C、25ML为处理D，以MS固体培养基常用量25ML为对照，调查脱毒苗生长速度和小苗健壮情况，并进行成本分析。、

1.2.2 操作

培养基 pH值调至5.8，消毒灭菌后接种，试管苗每一处理接种25瓶，每瓶接种10个带 1个叶腋的切段，然后放置在相同条件下培养，液体培养基必须静置培养，10天内不能移动培养瓶。

1.2.3 观察记录

接种后10d、20d、30d分别随机抽取每处理5瓶50株调查，观察植株生长发育动态情况，取出小苗进行测量，记载叶片数、茎节数、发根数，小苗长势、叶片状态、小苗状态、株高、茎粗等。

测量仪器：叶面数、茎节数、发根数、小苗长势、叶片状态、小苗状态用肉眼观察记载；株高测量用普通三角尺，茎粗测量用0.02mm游标卡尺。

2.结果与分析

试验结果可见，液体培养基不同量对脱毒马铃薯苗的生长发育有明显影响。从表1和试验中观察情况来看，液体培养基1Oml和15m1处理生长前期无较大差异，后期1Oml生长明显变弱叶片变黄，15ml处理生长健壮；15mI、20 ml、25mI三个处理随着量的增加切段发芽减慢，植株渐矮，茎渐细，茎节数、发根数渐少。试验中还见到 20ml和 25 的小苗茎基部弯曲，量越大越弯曲；对照培养基，发芽速度不如液体培养基快，生长速度与处理C相当，比处理D快，到30天后还正常生长且比较健壮。

表1：MS液体培养基不同用量对马铃薯脱毒苗生长的影响

小苗生长情况分析：试验处理中，培养基营养元素相同，pH值相同，培养条件也相同，使用250ml广口培养瓶培养马铃薯脱毒苗，成苗时间25-30天，在成苗前生长最佳的培养基用量为液体15ml。培养基用量过少不能满足小苗一生的营养需要，过多则液体培养基处理会使接种的切段浸没于水中，因缺氧而不易发芽。而成苗后，液体培养基基本耗尽而不能维持小苗生长，而对照固体培养基明显还足以维持小苗的生长。

成本分析：试验明显看出，利用液体形态的培养基，250ml培养瓶，放置15ml培养液，可以正常成苗，生长健壮，培养25天即可成苗移栽隔离网棚，成苗速度快，用量只有对照固体培养基的60%，且不需要用琼脂，因而成本要可比对照降低40％以上。

结论与讨论

利用MS固体培养基小苗发芽生长速度慢，成苗时间延长，且成苗后还可以维持较长一段时间，可以减少继代接苗次数，有利用脱毒苗保存阶段的工作。

在马铃薯脱毒苗扩繁阶段，利用MS液体培养基每瓶（250ML广口培养瓶）放置15ml可以培育壮苗，此法较以往我们所用的 MS固体培养基25ML发芽和生长速度快，小苗生长健壮，成本要降低40%以上。利用 MS液体培养基扩繁马铃薯试管苗是降低马铃薯种薯生产成本的一条有效途径。